现代酶工程酶的分离纯化详细分析.ppt

第三章 酶的分离纯化 酶分离纯化的目的 　　酶分离纯化的目的是使酶制剂产品达到应用所需的纯度。 分离纯化过程包括3个基本步骤：1 抽提2 纯化3 制剂 Crude product concentration versus selling price (Dwyer, 1984) 某些生化物质在原料液中的浓度与价格的关系(1984年) 在分离纯化中必须注意：1 防止酶的变性失活；2 在分离纯化过程中的每一步都 应检测酶的活性，以确定酶的 纯化程度和回收率。 第一节 酶活力的测定 几个名词 1 酶活力或酶活性 2 酶活力单位 3 mol催化活性（分子活性）和转换 数（催化中心活力) 4 酶的比活力 酶活力（又称酶活性） (enzyme activity)（IU/g或IU/mL) 指酶催化一定化学反应的能力；用在一定条件下，所催化的反应初速度来表示；是研究酶的特性，酶制剂生产应用以及分离纯化时的一项必不可少的指标。 酶活力单位(enzyme activity unit) 表示酶活力大小的尺度； 一个国际单位（IU）是指在特定条件下（25 0C），每分钟内转化1?mol底物或催化形成1?mol产物所需的酶量 一个Kat是指每秒钟内转化1mol底物所需的酶量，1 Kat = 6?107 IU。 mol催化活性（分子活性）