2014抗逆性-MDA-SOD实验课程.pptVIP

植物组织中MDA含量的测定  实验目的 了解胁迫反应的具体机制（膜脂过氧化 抗氧化） 掌握膜脂过氧化作用产物MDA含量的测定方法 丙二醛(MDA)是细胞膜脂过氧化作用的产物之一，它的产生还能加剧膜的损伤。因此，丙二醛产生数量的多少能够代表膜脂过氧化的程度，也可间接反映植物组织的抗氧化能力的强弱。所以在植物衰老生理和抗性生理研究中，丙二醛含量是一个常用指标。 植物对活性氧产生有酶促和非酶促两类防御系统： 酶促防御系统: SOD、CAT、POD和APX等 非酶促抗氧化剂: ASA和GSH等 背景知识 实验原理 测定植物体内MDA含量，通常利用硫代巴比妥酸(TBA)在酸性条件下加热与组织中的MDA产生显色反应，生成红棕色的三甲川（3、5、5－三甲基恶唑2、4－二酮），该物质在532nm波长下有最大吸收峰。 测定植物组织中MDA时受多种物质的干扰。植物遭受干旱、高温、低温等逆境胁迫时可溶性糖增加，糖与硫代巴比妥酸显色反应产物的最大吸收波长在450nm处，在532nm处也有吸收。因此测定植物组织中MDA与硫代巴比妥酸反应产物含量时一定要排除可溶性糖的干扰。 此外在532nm波长处尚有非特异的背景吸收的影响也要加以排除。 在MDA含量测定时，同时测定600nm下的吸光度，利用532nm与600nm下的吸光度的差值计算MDA的含量。 材料、仪器设备及试剂 （一）材料:小