第8章基因的表达与调控(下)论述.ppt

? 5′m7G帽结构是否存在和是否易于接近eIF-4F对翻译效率有着明显的影响 ? 5 ′端非翻译区的长度也会影响到翻译的效率和起始的精确性 ? 5′端非翻译区的二级结构影响到调控蛋白与帽结构的接近 ? mRNA 3′端的poly (A)不仅和mRNA穿越核膜的能力有关，而且影响到mRNA的稳定性和翻译效率。 转运铁蛋白受体（TfR）和铁蛋白负责铁吸收和铁解毒。这两个mRNA上存在相似的顺式作用元件，称为铁应答元件（iron response element，IRE）。 IRE与IRE结合蛋白(IREBP)相互作用控制了这两个mRNA的翻译效率。当细胞处于缺铁或高铁水平时，能产生两个数量级的蛋白水平差异，却没有在mRNA水平上发现存在显著差异。 2、翻译的起始调节 研究表明，位于5’非翻译区的IRE控制了铁蛋白mRNA的翻译效率，去掉这个非翻译区IRE，可造成铁蛋白的永久性高水平翻译。当细胞缺铁时，IREBP与IRE具有高亲和力，两者的结合有效地阻止了铁蛋白mRNA的翻译，从而阻止了铁解毒（铁排泄） 。与此同时，TfR mRNA上3’非翻译区中的IRE也与IREBP特异结合，有效地阻止TfR mRNA的降解，促进TfR蛋白的合成。 缺铁时 催乳素能明显延缓酪蛋白(casein)mRNA的降解。不加入催乳素时，体系中的酪蛋白mRNA在1小时内降解50%，而加入催乳素后40小时，酪蛋白mRNA才降解50％。这就是说，催乳素能调节酪蛋白mRNA有更多机会进行翻译，产生更多的酪蛋白。 3、可溶性蛋白因子的修饰与翻译起始调控 许多可溶性蛋白因子(起始因子)，对蛋白质合成的起始有着重要的作用，对这些因子的修饰会影响翻译起始。 用兔网织红细胞粗抽提液研究蛋白质合成时发现，如果不向这一体系中添加氯高铁血红素，网织红细胞粗抽提液中的蛋白质合成抑制剂HCI就被活化，蛋白质合成活性在几分钟之内急剧下降，很快就彻底消失。 现已查明，网织红细胞蛋白质合成抑制剂HCI是受氯高铁血红素调节的eIF-2的激酶，可以使eIF-2的α-亚基磷酸化并由活性型转变为非活性型。 5、小分子RNA的调控 ◆反义RNA调控 1984年Adelman等发现大鼠的促性腺激素释放激素（gonadotropin releasing hormone,GnRH）的基因两条链都能转录，首次在真核中发现了反义RNA。 在线虫（C.elegans）中，控制幼虫发育的基因lin 14基因受到lin 4基因的反义调节。这是一种对翻译模板的抑制来进行调控的途经。 ◆干扰RNA（RNAi）的调控 近年来的研究表明,一些小分子双链RNA通过特异性结合互补链，促使mRNA降解，从而特异地抑制体内特定基因的表达导致细胞表现出特定的基因缺失表型，引发转录后沉默（Post-transcriptional gene silencing，PTGS），称为干扰RNA（RNA interference，RNAi）。 作用机制： 起始阶段 dsRNA siRNA或指导RNA Dicer（切块酶） siRNA双链结合一个核酶复合物从而形成RNA诱导沉默复合物（RNA-induced silencing complex, RISC）。激活RISC需要一个ATP依赖的将siRNA解链的过程。激活的RISC通过碱基配对定位到同源mRNA转录本上，影响基因表达。 在各种生物中（植物、原生动物、昆虫、线虫）中陆续发现了自然存在的RNAi现象。 效应阶段 较长的dsRNA转染哺乳动物引起非特异的基因表达抑制。可能的途径： A 长的dsRNA激活蛋白激酶PKR，PKR通过一系列的磷酸化使eIF2a失活，导致翻译抑制； B长的dsRNA激活RNaseL，导致非特异的RNA降解。 ◆微小RNA (miRNAs)的调控 最近，在果蝇、线虫和Hela细胞中有大约100个新的~22个碱基的微小分子RNA（microRNAs，miRNAs）被鉴定出来，就像lin-4 和 let-7，这些miRNAs是在RNA前体分子折叠成茎环二级结构后形成的，这些新发现的miRNAs被认为是在基因表达调控过程中起某种调节作用。 ◆小分子时序RNAs (small temporal RNAs ,stRNAs)的调节