第3章酶分析.pptVIP

第三章 酶 复习 第三章 酶 第一节 酶的概述 二、酶促反应的特点 （1） 酶与一般催化剂的共同点 在反应前后没有质和量的变化； 只能催化热力学允许的化学反应； 只能加速可逆反应的进程，而不改变反应的平衡点。 都是通过降低反应分子的活化能来加快化学反应的速度。 （一）酶的催化效率 高 一种酶仅作用于一种或一类化合物，或一定的化学键，催化一定的化学反应并生成一定的产物。酶的这种特性称为酶的特异性或专一性。 （三）酶活性的不稳定性 酶的本质是蛋白质而大多蛋白质不稳定。 如：其在强酸或碱条件下易变性等。 高烧不退导致体乏无力的原因是什么？ 误食重金属的食物或农药为何导致人身体不适，怎样处理这种事件？ 第二节 酶的结构与功能 二、酶的活性中心与必需基团 活性中心内的必需基团 二、酶原与酶原的激活 二、同工酶 四、同工酶 不同组织中LDH同工酶的电泳图谱 心肌中以LDH1含量最多，LDH1对乳酸的亲和力较高，因此它的主要作用是催化乳酸转变为丙酮酸再进一步氧化分解，以供应心肌的能量。 骨骼肌和肝中含量最多的是LDH5，LDH5对丙酮酸的亲和力较高，因此它的主要作用是催化丙酮酸转变为乳酸，以促进糖酵解的进行。 第三节 影响酶促反应速度的因素 一、酶浓度的影响 二、底物浓度的影响 三、温度的影响 四、pH的影响 五、激活剂的影响 六、抑制剂的影响 (一) 不可逆性抑制作用 * 概念 抑制剂通常以共价键与酶活性中心的必需基团相结合，使酶失活。不能用透析方法去除。 * 举例 有机磷化合物 ?? 羟基酶 解毒 -- -- -- 解磷定(PAM) 重金属离子及砷化合物 ?? 巯基酶 解毒 -- -- -- 二巯基丙醇(BAL) 　 　 （二）可逆性抑制 1、竞争性抑制 定义 抑制剂与底物的结构相似，能与底物竞争酶的活性中心，从而阻碍酶底物复合物的形成，使酶的活性降低。这种抑制作用称为竞争性抑制作用。 2、非竞争性抑制 * 反应模式 ３.反竞争性抑制 * 反应模式 第四节 酶与医学的关系 复习思考题 1、酶浓度 2、底物浓度 3、温度 （最适温度的概念） 4、 pH （最适 pH的概念） 5、激活剂 6、抑制剂 ※ 研究一种因素的影响时，其余各因素均恒定。 在最适条件和底物浓度[S]足够大时， 酶促反应速度与酶浓度成正比。 0 V [E] 在其他因素不变的情况下，底物浓度对反应速度的影响呈矩形双曲线关系。 当底物浓度较低时 反应速度与底物浓度成正比；反应为一级反应。 [S] V Vmax 随着底物浓度的增高 反应速度不再成正比例加速；反应为混合级反应。 [S] V Vmax 当底物浓度高达一定程度 反应速度不再增加，达最大速度；反应为零级反应。酶被底物饱和。 [S] V Vmax 酶 活 性 0.5 1.0 2.0 1.5 0 10 20 30 40 50 60 温度 oC 温度对淀粉酶活性的影响 双重影响 ① 温度升高，酶促反应速度加快；温度升高10℃, 反应速度增加1~2倍 ② 由于酶的本质是蛋白质，温度升高，可引起酶的变性，即通过酶活性的减少而降低酶的反应速度。 最适温度(optimum temperature)： 酶促反应速度达到最大时的环境温度。 恒温动物：35～40℃ 植物体内的酶：40～55℃ 大部分的酶在60℃以上即变性失活。 低温的作用 : 贮存生物制品、菌种等 低温时由于活化分子数目减少，反应速度降低，但温度升高后，酶活性又可恢复。 临床上的低温麻醉 减少组织细胞的代谢程度，使机体耐受手术时氧和营养物质的缺乏 最适pH： 酶促反应最大时的环境pH。 多数酶：7.0左右 胃蛋白酶：1.8 肝精氨酸酶：9.8 选择合适的缓冲液保持酶的相对稳定和保持高活性。 pH 最适 pH v 酶的抑制剂 凡能降低酶活性但不引起酶蛋白变性的物质称为酶的抑制剂。 不可逆抑制 可逆抑制 1、竞争性抑制 2、非竞争性抑制 3、反竞争性抑制 依据： 能否用透析、超滤等物理方法除去抑制剂，使酶复活。 路易士气 失活的酶 巯基酶 失活的酶 酸 BAL 巯基酶 BAL与砷剂结合物 有机磷化合物对羟基酶的抑制 可逆性抑制剂与酶分子以非共价键相结合，从而使酶活性降低或丧失。这类抑制剂能用透析或超滤的方法去除，使酶活性恢复。 竞争性抑制 非竞争性抑制 反竞争性抑制 * 类型 * 概念 ⑴ 抑制剂往往是酶的底物结构类似物； ⑵ 抑制剂与酶的结合部位与底物与酶的结合部位相同—— 酶的活性中心 ⑶ 抑制作用可