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第二章 蛋白质与酶学基础; 酶促反应动力学研究酶促反应的速度以及影响酶促反应速度的各种因素，包括底物浓度、酶浓度、pH、温度、激活剂与抑制剂等。;酶促反应动力学基本公式;酶促反应动力学基本公式;酶促反应动力学基本公式;酶促反应动力学基本公式;酶促反应动力学基本公式;;催化常数, kcat;一些酶的催化常数; O R O H3C–C–N–C–C–O–CH3 H H; 影响酶反应速率的主要因素;;酶的抑制;;;竞争性抑制;磺胺类药也是一种竞争性抑制剂;抑制剂 Inhibitor;HIV蛋白酶与天冬氨酸蛋白酶;天冬氨酸蛋白酶以天冬氨酸吸住水分子;设计专一性的抑制剂;分子对称的HIV Protease 抑制剂;青霉素Penicillin 抗生素 ● 细菌细胞壁合成： 酶GT 把短链多肽▲接到细胞壁● ;细菌细胞壁含有短链氨基酸;青霉素Penicillin 抗生素 ● 细菌细胞壁合成： 酶GT 把短链多肽▲接到细胞壁● →青霉素类似酶GT 底物D-Ala-D-Ala (木马屠城) →青霉素与酶GT 活性区Ser-OH 反应 (捕鼠器) ● 化学修饰剂： → 共价修饰活性区上的氨基酸，抑制酶活性。 [E]-Cys-SH ... PCMB ←人造的protease inhibitor↓ [E]-Ser-OH ... DFP, TPCK (抑制胰凝乳蛋白酶); TLCK (胰蛋白酶) → Sarin神经毒气(抑制乙酰胆碱酯酶);Penicillin 与酶GT 活性区结合;Penicillin 构形类似细菌多糖;化学性共价修饰剂;有些毒气是酶抑制剂;Regulatory subunit; 酶原(zymogen)：酶的无活性的前体 酶原的激活：由无活性的酶原转变为有活性的酶的过程。 酶原激活的意义：在特定的环境和条件下发挥作用；避免细胞自身消化；有的酶原可以视为酶的储存形式。; 酶原激活的机理:;一些蛋白质裂解的例子 ● 胰岛素Insulin (非酶): A chain B chain；C chain ● 凝血机制Fibrin ← Thrombin ←←←←← 伤口 以cascade (梯瀑式) 诱发极为危险的凝血反应 ● 蛋白酶原活化机制Trypsin, Chymotrypsin, Elastase CT切出新的N-端(Ile16) 可结合Asp194 → 定位Ser195 Zymogen酶原(危险的酶) →以胞器隔离之;胰岛素分子含有A、B两条多肽链，链间以2对二硫键 相连。A链内还有1对二硫键。;凝血机制是一连串蛋白酶的作用;;怪头博士的绝妙发明;Cascade;蛋白酶之间互相裂解活化;赖;;Asp 102;; 通过其它酶对其多肽链上的某些基团进行可逆的共价修饰，使酶处于活性/非活性的互变状态，从而调节酶的活性。; 酶 酶-P ; 生理条件下： 几乎所有的蛋白激酶都以ATP为磷酸基的供体，几乎所有的磷酸化反应都需Mg2+。 （1）Thr、Ser、Tyr、Asp、Glu┉P-O键连接 （2）Lys、Arg、His┉P-N键连接;磷酸化造成剧烈的构形变动;;钙调蛋白的作用模式;（三）别构调控（allosteric regulation） ;别构酶ATCase（天冬氨酸转氨甲酰酶）;ATCase 分子构形改变影响活性;ATCase 分子构形变化情形;● Aspartate transcarbamoylase: (ATCase) → 其下游产物CTP 回馈抑制酶活性(-) → ATP 会增加ATCase 的活性(+) → ATP 与CTP 竞争同一调节区(R) → 底物Asp 的动力学作图得S 形曲线(sigmoidal) → ATCase 乃合作式协力现象cooperative →ATCase 的分子构形有relax (active) 及tense ◆ S 形曲线转折点可看做酶对基质浓度的感应点(开关）; S型曲线可以感受底物的浓度;;2.6、酶的稳定性; 影响酶稳定性的环境因素和酶失活机理;1、构象改变造成失活;2、共价结构变化的失活;;体外最常见的影响因素;; 稳定酶的方法