第十四章蛋白质合成分析.pptVIP

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第十四章蛋白质合成分析

第十四章 蛋白质的生物合成 遗传信息传递的 中心法则 遗传信息流动示意图 目 录 蛋白质合成体系 mRNA 遗 传 密 码 三联体密码的破译 以均聚物为模板指导多肽的合成 以特定的共聚物为模板指导多肽的合成 核糖体结合技术 遗传密码字典 遗传密码的性质 1966年Crick根据立体化学原理提出: 原核细胞mRNA的结构特点 真核细胞mRNA的结构特点 密码子与反密码子的配对关系 核糖体 核糖体的组成 真核和原核细胞参与翻译的蛋白质因子 蛋白质合成的机理 氨基酸的活化 N-甲酰甲硫氨酰-tRNAffMet的形成 氨酰- tRNA合成酶特点 原核生物多肽链的合成过程 肽链合成的起始 肽链的延长 Tu\Ts循环 肽键的形成 肽链合成的终止及释放 多核糖体 多多核糖体与核糖体循环 真核生物多肽链的合成(自学) 第四节 蛋白质定位 信号肽假说简图 分泌蛋白质的合成和胞吐作用 带有导肽的线粒体蛋白质前体跨膜运送过程示意图 问答题 原核生物多肽链的合成分为三个阶段:肽链合成的起始、肽链的延伸、肽链合成的终止和释放。 1、肽链合成的起始 2、肽链的延长 3、肽链合成的终止及释放 30S亚基? mRNA IF3- IF1复合物 30S? mRNA ? GTP- fMet –tRNA- IF2- IF1复合物 70S起始复合物 codon anticodon A位 P位 mRNA +30S亚基-IF3 A位 IF-3 5? 3? IF2 GTP P位 IF3 IF2 IF1 IF2-GTP-fRNA-tRNA IF3 50S亚基 IF2+ IF1+GDP+Pi IF-1 IF1 1、30S 核糖体小亚基与起始因子IF –1和IF-3相结合,诱发模板mRNA与小亚基结合。 蛋白质合成的起始 mRNA在小亚基定位结合 (1)原核生物mRNA通过5’端SD序列配对结合到核蛋白体小亚基上的16S rRNA近3’-末端处(有一段短序列…UCCU…)。IF-3对此有固定作用。 (2)紧接SD序列的小段核苷酸,又可以被核蛋白体小亚基蛋白(rps-l)辨认结合。 SD序列:在翻译起始密码子AUG的上游,相距约8—13个核苷酸处,有一段由4-9个核苷酸组成的富含嘌呤的序列。这一序列以AGGA为核心,因其发现者是Shine-Dalgarno而得名。mRNA上的SD序列又称为核蛋白体结合位点(RBS)。 mRNA在小亚基定位结合 2、由30S 小亚基、起始因子IF-1和IF-3及模板mRNA所组成的复合物立即与GTP-IF-2及fMet-tRNAfMet相结合。反密码子与密码子配对。 蛋白质合成的起始 3、上述六组分复合物再与50S大亚基结合,水解GTP生成并释放GDP和Pi。释放三个起始因子。 蛋白质合成的起始 1 2 1 2 2 3 2 3 进位 肽键形成 移位 进位 (Tu\Ts) GTP GTP N-端 2 3 5′ 3′ C-端 肽键形成 1 5′ 3′ (EF-G) 肽基转移酶 (1)释放因子RF1或RF2进入核糖体A位。 (2)多肽链的释放 (3)70S核糖体解离 5? 3? UAG 30S亚基 50S亚基 5? 3? UAG tRNA RF 第一个编码区 第一个编码区 第二个编码区 第二个编码区 终止\起始 终止 起始 mRNA mRNA 5′ 5′ 3′ 3′ 合成完毕的肽链 多核糖体 3ˊmRNA 延伸中的肽链 5ˊ 核糖体循环 1、真核细胞核糖体比原核细胞核糖体更大更复杂; 2、起始氨基酸为Met,不是fMet; 3、肽链合成的起始:由40S核糖体亚基首 先识别mRNA的5’端-帽子,然后沿mRNA移动寻找AUG; 4、起始因子有12种,但只有2种延长因子和1种终止因子; 5、真核细胞种线粒体、叶绿体的核糖体大小、组成及蛋白质合成过程都类似于原核细胞。 一、肽链合成后的修饰 1、肽链末端的修饰(N-端fMet或Met的切除) 2、信号序列的切除 3、二硫键的形成 4、部分肽段的切除(内含肽) 5、个别氨基酸的修饰 6、糖基侧链的添加 7、辅基的加入 示例:酶原的激活 第三节 肽链合成后的修饰与折叠 N C 新生多肽链 末端加工 多蛋白加工(polyprotein) 去除的末端 活性蛋白 三个活性蛋白 通过蛋白酶剪切进行加工 N C 内含肽 N C 剪接 内含肽的剪接 内含肽是蛋白质的内部片段,翻译后很快被去除,从而使两个外部片段和外显肽连接到一起。 内含肽剪接位点的序列:第一个氨基酸通常是Cys,有时为Ser,最后两个氨基酸基本上是His后接Asn。下游外显肽的第一个氨基酸是Cys、Ser或Thr。 胰岛素原的加工 A链

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