还原糖脂肪糖类鉴定试验资料.pptVIP

生物组织中还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定 （一）生物组织中还原糖鉴定试验 小试牛刀 判断： 1、还原性糖鉴定的实验原理是还原性糖加斐林试剂产生砖红色沉淀。 还原糖指什么？ 还原性糖概念：还原糖是指具有还原性的糖类。 在糖类中，① 分子中含有游离醛基或酮基的单糖。 ② 含有游离醛基的二糖都具有还原性。 如：葡萄糖分子中含有游离醛基，果糖分子中含有游离酮基，乳糖和麦芽糖分子中含有游离的醛基，故它们都是还原糖。 还原性糖包括葡萄糖、果糖、半乳糖、乳糖、麦芽糖等。 非还原性糖有蔗糖、淀粉、纤维素等，但它们都可以通过水解生成相应的还原性单糖。 鉴定步骤 考点总结 脂肪的鉴定步骤 取材：花生种子（浸泡3-4h）,将子叶削成薄片 取理想薄片 制片 在薄片上滴2-3滴苏丹Ⅲ染液，去浮色。 制成临时装片 观察：先在低倍镜下，找到材料的脂肪滴，然后，转为高倍镜观察。 现象：细胞中的圆形脂肪小颗粒已经被染成橘黄色 实验成功的要点 ①.脂肪的鉴定实验:选择富含脂肪的种子，以花生种子为最好(实验前浸泡3h～4h)。 ②该试验成功的关键：单层细胞理想薄片。 ③滴苏丹Ⅲ染液时，染色2-3min，时间不宜过长，以防细胞的其他部分被染色。 实验原理 蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应 蛋白质的鉴定步骤 选材：卵清稀释液或黄豆（浸泡1-2d） 豆浆 滤液 组织样液2ml 双缩脲试剂B液4 –5滴 结论：蛋白质与双缩脲试剂发生紫色反应。 注意事项 1.双缩脲试剂的使用，一定要先加入A液(即0.1 g/ml的 NaOH 溶液)，再加入双缩脲试剂B液(即0.01 g/ml的 CuSO4 溶液)。 2.还可设计一只加底物的试管，不加双缩脲试剂，进行空白对照，说明颜色反应的引起是蛋白质的存在与双缩脲试剂发生反应，而不是空气的氧化引起。 练习巩固 1.在生物组织中可溶性还原糖、脂肪、蛋白质的鉴定实验中，对实验材料的选择叙述中，错误的是（ ） A. 甘蔗茎的薄壁组织、甜菜的块根等，都含有较多的糖且近于白色，因此可以用于进行可溶性还原糖的鉴定 B. 花生种子含脂肪多且子叶肥厚，是用于脂肪鉴定的理想材料 C. 大豆种子蛋白质含量高，是进行蛋白质鉴定的理想植物组织材料 D. 鸡蛋清含蛋白质多，是进行蛋白质鉴定的良好动物材料 2.做“脂肪的鉴定”实验时，某学生制备以花生为生物组织材料的临时装片。在显微镜下观察花生子叶的切片时，发现有一部分细胞看得清晰，另一部分细胞较模糊，还是由于（） A. 反光镜光源不适合 B. 焦距没调整好 C. 镜头脏 D. 标本切得厚薄不均匀 4.下列关于还原糖、脂肪、蛋白质鉴定的实验操作步骤的叙述中，正确的是（ ） A. 用于鉴定可溶性还原糖的斐林试剂甲液和乙液，可直接用于蛋白质的鉴定 B. 脂肪的鉴定需要用显微镜才能看到被染成橘黄色的脂肪滴 C. 在蛋白质的鉴定实验中，若用蛋清作实验材料，可以直接使用，不必稀释 D. 供实验用的花生种子必须提前浸泡，浸泡时间应该长一点，便于切片 教师：杨丽 思考一：化学中学习过物质的鉴定，其原理是被鉴定的物质与所用的化学试剂要么发生颜色反应，要么产生沉淀。那么生物学中又是如何鉴定物质的呢？ 可溶性还原糖+ 斐林试剂→ 砖红色沉淀 （水浴加热） 反应物 反应物 现象 条件 实验原理 注意：反应物和条件缺一不可 2、蔗糖鉴定的实验原理是还原性糖加斐林试剂在水浴加热条件下产生砖红色沉淀。 （1）选材，选用可溶性还原糖含量高、白色或近于白色的植物组织，其中以苹果，梨最好。为什么？ （2）制备组织样液。 ①苹果：洗净、去皮、切块，取5g放如研钵中。 ②研磨成浆：加石英砂，加5 ml水研磨。 ③过滤：将玻璃漏斗插入试管中，漏斗上垫一层纱（为什么不是滤纸？） 组织样液2ml （3）加斐林试剂：2ml 考点:由斐林试剂甲液 （0.1 g/ml的NaOH）和乙液（ 0.05 g/mlCuSO4 溶液）充分混合而成，不能分别加入。 原则：使用的斐林试剂要 现配现用，混合均匀后一次加入， (在实验中改用班氏试剂更为简便)。 （4）水浴加热：煮沸2min ？ 思考：观察现象，试管中发生了什么变化，为什么？