转基因食品检测技术概要分析.pptVIP

转基因食品检测技术 厦门食品科技研发检测中心 黄金大米(右)与普通大米(左)的比较。黄金大米(英语:Golden Rice)是一种转基因稻米品种，由美国先正达种子公司参与研发。 1.关于转基因作物安全性的争论 17日，在武汉举行的全球转基因农作物发展现状和未来展望国际研讨会上，来自中国、美国、巴西等10个国家的19位生物技术科学家联名发表“八点共识”，支持转基因技术用于农作物种植以确保农业可持续发展，呼吁包括中国在内的多个国家，依法推进转基因作物的产业化。 2008年，美国塔夫茨大学研究人员在湖南省衡南县江口镇中心小学25名儿童中，开展了“黄金大米”烹制米饭的人体试验。 央视记者武汉转基因水稻调查：随机买5袋米3袋有转基因 农业部官员：18年来无一起转基因食品安全问题 中国暂停转基因大豆进口审批 因是接受度低 1.1你会接受GMF吗？ ？ 2.主要的转基因上市公司 3. 转基因食品的检测方法 检测主要从两 个方面入手 一是核酸水平，即检测遗传 物质中是否含有插入的外源 基因 二是蛋白质水平，即通过插入外 源基因表达的蛋白质产物或其功 能进行检测，或者是检测插入外 源基因对载体基因表达的影响 3.1核酸水平 此种方法主要检测报告基因、启动子和终止子，是当前转基因产品检测的重要手段。 核酸水平检测 3.1.2定性检测 3.1.3定量检测 3.1.2定性检测 聚合酶链式 反应(PCR) 每一次实验均需要设有阴性及阳性对照以确保实验结果可靠性。在样品采集及处理过程中也需要注意防止污染。 以特定的基因片段( DNA 片断)为模板, 利用人工合成的一对寡聚核苷酸为引物, 以4种脱氧核苷酸( dNTP)为底物, 在耐高温聚合酶的作用下, 通过DNA 模板的变性、退火及引物的延伸3个阶段的多次循环, 使模板扩增。转基因细胞转入的基因成分一般包括启动子( Promotor)、报告基因( Reporter G ene )、目的基因( Target Gene)、终止子( Term inator) , 其中启动子和终止子为表达目的基因所必需的[ 13] 。至今, 转基因植物常用的是花椰菜花叶病毒启动子( CaMV 35S )和根癌农杆菌终止子( NOS)。通过PCR 扩增这些特殊的启动子和终止子序列, 是目前最常用的鉴定食品中有无转基因成分的方法。 聚合酶链式 反应(PCR) 核酸印记法(southern blot) 以放射性或荧光标记的外源目的基因的同源序列作为探针与该食品原料农产品的总DNA进行杂交。首先用限制酶消化受体总DNA，通过琼脂糖凝胶电泳按大小分离所得的片断，随后使DNA在原位发生变性，并从凝胶转移至一固相支持体上。DNA转移至固相支持体的过程中，各个DNA片断的相对位置保持不变，用放射性或荧光标记的探针与各个DNA片断杂交，经放射自显影确定与探针互补的电泳条带的位置。核酸印记法技术用于食品外源基因的检测可检测出外源基因与内源基因有高度同源性的DNA片断，且准确可靠，但对样品的纯度要求较高，费用也较高。 3.1.3定量检测 定量检测 生物传感器(Bio -sensor)技术 基因芯片(Microar -ray) 技术 多重荧光PCR 实时荧光定量PCR (Real-time Fluorescence Quantitative PCR) 竞争性PCR PCR—ELISA定量 具有PCR方法的相同优点，可以精确地进行 GMO的定性检测。不同之处为可在固体表面固定上千个特定的探针，能够一次单独分析样品中的大量的不同种类的GMO，进行筛查、定性、定量，具有高通量、集成化和自动化的特点。此外，微阵列技术非常灵活，当有新的GMO出现时可以在阵列中增加布点，将新的基因序列包括在筛查程序中。 生物传感器技术 生物传感器(biosensor)对生物物质敏感并将其浓度转换为电信号进行检测的仪器。是由固定化的生物敏感材料作识别元件（包括酶、抗体、抗原、微生物、细胞、组织、核酸等生物活性物质）与适当的理化换能器（如氧电极、光敏管、场效应管、压电晶体等等）及信号放大装置构成的分析工具或系统。生物传感器具有接受器与转换器的功能。 3.2蛋白质水平 蛋白质水平检测 蛋白质印迹法(Western blot):将电泳较高的分离能力、抗体的特异性和显色酶反应的灵敏性结合起来, 是检测复杂混合物中特异蛋白质最有力的工具之一, 普遍用于分离、检测特异的目的蛋白质 酶联免疫吸附法(enzyme-linked immuno sorbent assay，ELISA) 试纸法 ：主要将特异的抗体交联到试纸条 上和有颜色的物质上, 当纸上抗体和特异抗原结合后, 再和带有颜色的特异抗体进行反应, 就形成了带有颜色的三明治机构, 并且