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7、基因工程的基本原理是让人们感兴趣的基因在宿主细胞中稳定和高效地表达。 8、基因工程的基本操作步骤包括目的基因的获得、重组DNA的形成、重组DNA导入受体细胞、筛选含有目的基因的受体细胞、目的基因的表达。 9、获得目的基因通常有两种办法，如果目的基因的序列是已知的，我们可以用化学方法合成合成目的基因，或者用聚合酶链式反应（PCR）扩增目的基因；如果序列是未知的，我们可以建包括目的基因在内的基因文库。 10、目的基因与运载体结合用限制性核酸内切酶处理目的基因和运载体，而后加入DNA连接酶，使目的基因载入到运载体中，形成重组DNA分子。 11、用质粒作为载体，宿主细胞应该选择大肠杆菌，用氯化钙处理大肠杆菌，增加含有大肠杆菌细胞壁的通透性，便于重组质粒进入宿主细胞。并不是所有的细胞都接纳了重组DNA，因此需要用标记基因筛选含有目的基因的受体细胞。 2、在创伤表面形成一种相对没有分化的活的薄壁细胞团组成的新生组织，这就是愈伤组织。 胚性细胞的特征：细胞质丰富、液泡小而细胞核大。 3、用纤维素酶和果胶酶水解细胞壁，可以获得原生质体（包括质膜、细胞质和细胞核） 4、植物原生质体特点：易于摄取外源DNA，便于细胞进行融合，————，————。（不用订正） 5、植物细胞工程的概念和操作过程是：借助基因工程方法，将外源遗传物质（DNA）导入受体细胞中，或通过细胞融合、显微注射等将不同来源的遗传物质重新组合，再通过这些转基因细胞或重组细胞进行培养，获得具有特定性状的新植株。 6、植物体细胞杂交过程中：原生质体融合完成的标志是 植物细胞再生出细胞壁 （解释：植物细胞再生出细胞壁才能说明融合的细胞有了活性 ） 1、精卵融合成为受精卵的过程称为受精。受精大体 包括精卵识别（识别依靠特异性蛋白）、精子附着于卵、 精卵质膜融合等几个过程。 2、受精卵是动物个体发育的起点。卵裂产生的细胞团 称卵裂球，随着卵裂球细胞数目的增加，细胞逐渐变小 。当卵裂球含2~8个细胞时，其中的每一个细胞都具有全能性，均可发育成一个完整的个体。 3、卵裂球的细胞继续分裂，细胞间逐渐出现小的腔 隙，称囊胚或胚泡。囊胚外表为一层扁平细胞， 称滋养层，将来发育成胚胎的附属结构或胚外结构。囊 胚内部的细胞团不断增殖分化，将发育成完整的胚 胎。内细胞团的细胞为胚胎干细胞，是一种未分化的细胞， 具有发育全能性，能分化出成体动物的所有组织和器官 4、囊胚进一步发育，逐步形成内中外三个胚层，这时的胚胎称原肠胚，其内中外3个胚层逐渐分化形成各种器官原基。 5、胚胎工程通常指各种胚胎操作技术。胚胎工程的研究对象主要限定于高等脊椎动物，特别是哺乳动物。研究的重点内容有体外受精、胚胎体外培养、胚胎移植、胚胎分割、胚胎干细胞培养等。 6、体外受精的过程是：（1）将成熟的精子放入培养液中培养，使精子达到获能状态；（2）采集成熟的卵细胞。（3）受精。（4）受精后形成的受精卵需经早期培养，才能完成植入或着床，通常移植的最适宜时期是发育到8细胞以上的胚胎。（5）经分娩产仔就得到“试管动物”。 7、胚胎移植技术是指将经济价值高、遗传性状优良的母畜，经过促性腺激素（激素名称）处理，使其超数排卵后受精，然后将发育的早期胚胎分别移植到同期发情的代孕母的子宫内，通过代孕母妊娠产仔的技术。提供胚胎的动物称为供体，接受胚胎的动物叫做受体。 8、胚胎移植成功与否的基本条件：供体和受体必须为同种动物，且生理状态相同。 9、胚胎分割是指借助显微操作技术将早期胚胎切割成几等分，再移植到代孕母子宫中发育，产生同卵多仔后代的技术。 10、胚胎分割的基本过程是：将发育良好的胚胎移入含有培养液的培养皿中，在显微镜下用切割针或切割刀把胚胎分割开，或采用酶处理等方式将卵裂球中的细胞分散开；分割的胚胎或细胞直接移植给受体，或在体外培养到囊胚阶段，再移植到受体内，着床发育产仔。 11、当受精卵分裂发育成早期胚胎（囊胚）时，内细胞团的细胞为胚胎干细胞（ES细胞）。胚胎干细胞是一种未分化细胞，具有发育全能型和二倍体核型。 12、培养胚胎干细胞的关键是需要一种培养体系。这种体系必须能促进胚胎干细胞的生长，同时还要抑制胚胎干细胞的分化。在培养胚胎干细胞时，首先要在培养皿底部制备一层细胞，称为饲养层，该细胞一般是胚胎成纤维细胞，因为胚胎成纤维细胞可以分泌一些能抑制细胞分化的物质，满足促进干细胞生长的同时抑制干细胞分化的条件。 13、胚胎干细胞核移植是指把胚胎干细胞的细胞核移植到去核的卵细胞中，经过胚激活、胚胎培养、胚胎移植后直接由受体完成克隆动物的技术。 14、由于胚胎干细胞具有发育全能性，在适当的条件下，胚胎干细胞可被诱导分化为多种细胞、组织、器官，具有重要的生产和临床医学价值。 * 1、基因工程诞生的理论基础：——————是遗传物