发酵工程讲课重点.ppt

发酵工程在医药研究和生产中的应用 ?1　微生物发酵工程与医药 1.1　抗生素的微生物合成 抗生素原指微生物产生的、能在低浓度杀死或抑制细菌或真菌等微生物的物质，也包括天然产生的抗生素经化学方法改造所得的半合成抗生素，并且将能抑制肿瘤、原虫等微生物产物也归入抗生素类。抗生素的化学结构种类繁多，主要有糖类、肽类、蛋白质类、核苷类、多烯类、多醚类、内酰胺类、大环内酯类、四环类、安莎类等。抗生素主要用于治疗微生物感染和抗癌。 目前，已找到的抗生素有数千种，其中具有临床效果并已利用发酵法大量生产和广泛应用的多达百余种。在已发现的抗生素中，由真菌产生的约占13％，由地衣产生的在1％以下,由细菌产生的约占12％，由放线菌产生的约占67％。在放线菌所产生的抗生素中，约90％是由链霉菌产生的。 临床主要应用的抗生素 头孢菌素类抗生素 已发展到第四代，主要研究动向是提高抗革兰阳性菌、铜绿假单胞菌和厌氧菌活性。对金葡菌等革兰阳性球菌的作用强于第三代，对头孢菌素酶（AmpC）的稳定性也优于第三代，因产AmpC酶而对第三代头孢菌素耐药的肠杆菌属、柠檬酸菌属、普罗菲登菌属及沙雷菌属仍对第四代头孢菌素敏感； 碳青霉烯类抗生素(亚胺培南/西司他丁、美罗培南和帕尼培南/倍他米隆) ?抗菌谱最广的一类β-内酰胺类抗生素，抗菌活性强，对β-内酰胺酶（包括产ESBLS和AmpC酶）高度稳定。对铜绿假单胞菌外膜的透过性强，最低抑菌浓度（MIC）与最低杀菌浓度（MBC）非常接近，对革兰阴性菌也有一定的抗菌后效应（PAE）。 氨基糖苷类抗生素 大环内酯类抗生素????近年来开发的新品种有罗红霉素、克拉霉素、阿奇霉素、乙酰麦迪霉素、罗他霉素等，在药效学、药动学特性以及不良反应等方面较沿用品种均有所改进。对胃酸的稳定性增加，生物利用度高，血药浓度和组织浓度增高，半衰期延长，每日的给药剂量及给药次数减少，胃肠道等不良反应也明显减轻，临床适应证有所扩大。 四环素类抗生素 糖肽类抗生素?万古霉素、去甲万古霉素与替考拉宁是控制MRSA等革兰阳性菌重症感染“王牌”药物。新糖肽类抗生素(1)Oritauancin AUC比万古霉素大10倍，对耐万古霉素肠球菌（VRE）MRS与耐青霉素肺炎链球菌（PRSP）有较强活性；（2）雷莫拉宁：能抑制细胞壁肽聚糖合成，但作用位点不同于万古霉素。对需氧性与厌氧性革兰阳性细菌有强大杀菌作用，对耐万古霉素的屎肠球菌也有作用。 抗生素作用机理 寻找新的抗生素仍然是很重要的任务。以抗肿瘤、抗病毒、抗真菌、抗原虫、广谱和抗耐药菌的抗生素为主要研究方向。 ?1.2　维生素类药物的微生物生产 β-胡萝卜素 维生素C 维生素E 国内用真菌三孢布拉霉生产β-胡萝卜素的产量达2.0?g/L，国外已达到(3～3.5)?g/L.粘红酵母、布拉克须霉、丛霉等真菌也具有生产β-胡萝卜素的能力。除真菌外，如球型红杆菌、瑞士乳杆菌等某些细菌也具有发酵生产类胡萝卜素的能力。 Vc的微生物发酵法早已取得重要突破，利用“大小菌落”菌株混合培养生产VC的工艺已经成熟，进入产业化。 目前利用氧化葡萄糖杆菌与一种蜡状芽孢杆菌混合菌共固定化发酵技术，可将Vc的收率提高到80%以上，生产周期比传统工艺缩短1/3。 日本研究人员发现一种纤细裸藻能同时生产Vc、VE和β-胡萝卜素,藻体生物量产量可达每升培养液20?g，从中提取Vc和VE量为60?mg/L,β-胡萝卜素40?mg/L. ?1.3　多烯脂肪酸的微生物生产 γ-亚麻酸(GLA) :人体不能合成而又必需的多烯脂肪酸，缺乏时会导致机体代谢的紊乱而引起多种疾病，如高血压、糖尿病、癌症、病毒感染以及皮肤老化等。因此，体内补充GLA已成为治疗疾病和抗衰老的重要手段。 GLA在体内转化为二高γ-亚麻酸(DGLA)和花生四烯酸(AA)，两者再分别合成前列腺素类物质而发挥对人体生理功能的重要调节作用。 深黄被孢霉可用于生产γ-亚麻酸。 二十碳五烯酸(EPA)和二十二碳六烯酸(DHA) 是很有价值的医药保健产品，在海洋冷水鱼中含量颇丰，也可用发酵工程的方法生产。 细小球藻中EPA含量高达总油量的99%，等鞭藻的DHA含量为5.4 mg/g干藻体。 网粘菌SR21，DHA含量为其干菌体脂质含量的30%～40%，通过发酵生产，每升培养液产量为4.5?。 ?1.4　医用酶制剂的发酵生产 心脑血管病医用酶(链激酶、葡萄糖激酶、金葡激酶 )：上海医科大学获高表达链激酶, 这种重组链激酶一进入中试生产后, 在我国作为第一个拥有自主知识产权的一类生物技术新药进人商品化, 成为挽救急性心肌梗塞和脑血栓形成等疾病的特效药。 心脑血管病保健用酶：中国根霉产新的溶血栓酶，纳豆激酶和天酷激酶。 酶与帕金森氏症(β酪氨酸酶)：一种假单胞菌具有高产