四：蛋白质分解.ppt

4.4 蛋白质的分子结构 名称 肌红蛋白 血红蛋白 组成 一条多肽链和一个血红素辅基构成 由四个亚基组成（2个a链，2个b链，a2b2），每条肽链含一个血红素辅基 大小 分子量16700，含153个氨基酸残基 分子量64000，a链141个残基，b链146个残基 功能 在哺乳动物肌肉细胞中运输和储存氧，为生物氧化直接提供O2 红细胞的主要成分，是红细胞运输O2和CO2的载体 结构 包含8个a-右手螺旋，许多疏水侧链存在于分子内部，形成疏水的空穴。 每一个亚基与肌红蛋白结构相似 氧合曲线 双曲线 S形 4.4 蛋白质的分子结构 4.4 蛋白质的分子结构 又称铁卟啉，是肌红蛋白、血红蛋白及许多其它血红素蛋白质的辅基，由卟啉环与一个Fe(II)离子组成。 4.4 蛋白质的分子结构 血红蛋白的四级结构 肌红蛋白 血红蛋白b亚基 4.4 蛋白质的分子结构 肌红蛋白的氧合曲线 血红蛋白的氧合曲线 双曲线 S形曲线 高氧分压下能结合同样数量的O2 。 低氧分压下，肌红蛋白容易吸收氧，血红蛋白容易释放氧。 4.4 蛋白质的分子结构 变构效应（别构效应）：蛋白质的一个亚基与效应物结合后发生构象改变，引起相邻亚基的构象变化，从而使蛋白质的生物活性改变（提高或降低）的效应。 变构蛋白：具有变构效应的蛋白质。血红蛋白就是典型的变构蛋白。 协同效应 正协同效应（激活） 负协同效应（抑制） 4.4 蛋白质的分子结构 S形氧合曲线的生理意义 氧分压较大变化不会引起血液中的氧饱和度太大变化，即存在较多氧合血红蛋白。 氧分压不大的变化会引起血液中的氧饱和度较大下降，即氧合血红蛋白能较多地释放氧，满足生物氧化的需要。 4.5 蛋白质的性质 胶体性质 酸碱性质 蛋白质的紫外吸收 蛋白质的变性 蛋白质的颜色反应 胶体性质 4.5 蛋白质的性质 蛋白质水溶液是一种比较稳定的亲水胶体。 蛋白质分子表面的水化层和同性电荷是亲水胶体稳定的因素。去掉这两个因素，则蛋白质从溶液中析出而产生沉淀。 透析用于分离纯化蛋白质 盐析和有机溶剂沉淀法的基本原理 酸碱性质 4.5 蛋白质的性质 正负电荷互相吸引，使蛋白质分子内部紧缩，分子间有聚集的趋向，此时溶解度最小。 蛋白质电泳现象 可用于蛋白质的分离纯化。 蛋白质的等电点：使溶液中蛋白质分子所带的正负电荷相等，即净电荷为零时溶液的pH值。 蛋白质的紫外吸收 4.5 蛋白质的性质 蛋白质分子中的Trp、Tyr、Phe在280nm附近有最大吸收。可用于蛋白质的定性定量分析。 蛋白质的变性 4.5 蛋白质的性质 注意：一级结构没有变化！ 天然蛋白质在某些物理或化学因素的作用下，其空间结构（构象）发生改变，从而引起理化性质的改变和生物活性的丧失。 变性的因素 物理因素：热、紫外线、 X-射线、超声波、高压、 剧烈振荡、搅拌 化学因素：强酸、强碱、 有机溶剂、尿素、盐酸胍、 三氯醋酸、重金属盐 复性：当去除蛋白质的变性因素后， 蛋白质又恢复原来的结构及生物活性。 变性的可逆性是一级结构决定高级结 构的有力证据。如核糖核酸酶的可逆变性。 4.5 蛋白质的性质 理化因素 次级键 断裂 空间结构 破坏 理化性质改变 生物学活性丧失 溶解度下降 易被酶水解 粘滞度增加 酶失去催化活性 激素失去调节功能 Ag-Ab失去免疫原性 蛋白质的变性 应用变性因素进行消毒、灭菌。 制备或保存生物制剂要防止蛋白质变性。 蛋白质的颜色反应 4.5 蛋白质的性质 双缩脲反应 酚试剂反应 用于蛋白质定量 思考题 1. 名词解释：蛋白质的一级结构、二级结构、三级结构、四级结构、超二级结构、结构域、蛋白质的变性和复性、蛋白质的等电点，变构效应 2. 简述蛋白质的主要功能。 3. 组成蛋白质的氨基酸有多少种？试述氨基酸的分类。 4. 蛋白质各级结构的特点是什么？维系蛋白质各级结构的化学键是什么？ 5. 简述蛋白质分子结构与功能的关系。 6. 比较肌红蛋白与血红蛋白氧合曲线的差异，说明为什么？ 7. 哪些因素会促使蛋白质变性？变性蛋白与天然蛋白有什么不同？ 4.3 肽 生物活性肽 指对生物机体的生命活动有益或具有生理作用的肽类化合物，又称功能肽。 含量微量，功能显著 吸收机制优于氨基酸 与生物的生长、发育、细胞分化、大脑活动、肿瘤病变、 免疫防御、生殖控制、抗衰老、生物钟规律及分子进化 等相关 是机体内传递信息、调节代谢和协调器官活动的重要化 学信使 如谷胱甘肽、神经肽、抗菌肽等 4.3 肽 重要的三肽——谷胱甘肽（GSH） 组成：谷氨酸、半胱氨酸和甘氨酸