核酸化学 1讲述.pptVIP

学习要求: ⑴掌握核酸的化学组成,结构及性质 ⑵了解核酸的制备步骤和方法(提取分离纯化) 重点:核苷酸的结构,核酸的结构和性质 难点:核酸的结构 一.核酸概述 1.核酸概念：细胞内产生的有重要生物活性的线性酸性多聚核苷酸。 2.核酸种类与分布： （1）核酸种类： DNA 和RNA 1）脱氧核糖核酸（deoxyribonucleic acid- DNA） 型式：通常双链 环状双链DNA：原核生物染色体DNA，细胞器DNA线性双链DNA：真核生物染色体DNA（末端为端粒）病毒DNA有环状，线性，单链，双链 二.核酸的化学组成 2.核酸的分子组成 ——基本结构单元：核苷酸 嘌呤 1）碱基的结构特征 ①嘌呤环和嘧啶环均呈平面或接近于平面，具有芳香环的结构特征。 ②碱基的芳香环与环外基团可以发生酮式—烯醇式或胺式—亚胺式互变异构。 核酸：除5类基本碱基外，还有稀有碱基——含量甚少，基本碱基化学修饰。 两种： RNA：戊糖为β-D-核糖 DNA：戊糖为β-D-2-脱氧核糖 （3）核苷 nucleoside 嘌呤的N9与戊糖C-1｀-OH以N - C糖苷键相连接 嘧啶的N1与戊糖C-1｀-OH以N - C糖苷键相连接 （4）核苷酸（nucleotide） RNA：5′-磷酸-核糖核苷 DNA：5′-磷酸-脱氧核糖核苷 Ⅱ、稀有核苷酸 Ⅰ｀碱基化学修饰 Ⅱ｀C—C糖苷键如：tRNA中的假尿苷（?） Ⅲ｀核糖化学修饰(少见） Ⅳ｀tRNA中的胸腺嘧啶核糖核苷 第Ⅳ类：环化核苷酸 Cyclic AMP cAMP 和 cGMP cAMP(3’,5’- 环腺嘌呤核苷一磷酸) cGMP( 3’,5’-环鸟嘌呤核苷一磷酸) 主要功能：细胞之间传递信息的信使（第二信使）。 第Ⅴ类：辅酶核苷酸 NAD+ NADP+ FMN FAD CoA等：核苷酸衍生物 2）核苷酸的生物学作用 ①参与DNA、RNA合成、蛋白质合成、糖与磷脂的合成(作为代谢中间物的载体：如用UDP携带糖基，用CDP携带胆碱，胆胺或甘油二酯，用腺苷携带蛋氨酸（SAM）等 。) ②在能量转化中起重要作用： ATP是生物体内能量的通用货币。 ③参与细胞中代谢与调节（cAMP、cGMP）。 ④构成多种辅酶的成分： NAD、NADP、FAD、FMN和CoA。 1.特点：DNA碱基组成特点 （1946-50，Chargaff定则）： 1）在所有的DNA中，A=T，G=C 即A+G=T+C，A+C=T+G 6-氨基=6-酮基——四核苷酸假说让位 2）DNA的碱基组成具种属特异性，即不同生物种属的DNA具有自己独特的碱基组成。 3）无组织和器官特异性。 4）碱基组成不受年龄、生长状况、营养状况和环境等条件影响。 2.生物学意义：遗传信息存储的分子形式 RNA的一级结构：核糖核苷酸按一定排列顺序以3 ′-5 ′磷酸二酯键连接形成的共价结构。 1.特点：单链分子；分子中不遵守碱基种类的数量比例关系，即分子中的嘌呤碱基总数不一定等于嘧啶碱基的总数；tRNA中存在一些稀有碱基。 2.生物学意义：mRNA的一级结构直接为蛋白质氨基酸编码,并决定蛋白质的氨基酸序列。 （2）一级结构的表示方法： ③字母式表示法：书与文献中 5｀pA-pC-pG-pT-pAoH 3 ｀或 5｀pApCpGpTpAoH 3 ｀ 5 ｀pA-C-G-T-AoH 3 ｀或5 ｀pACGTAoH 3 ｀ A-C-G-T-A或ACGTA 1）DNA的二级结构 ⅰ.DNA的X衍射研究：Rosalind Franklin(1920-58) ——显示DNA是双螺旋结构。 ⅰ.两条脱氧核糖核苷酸链(DNA单链)反向平行沿同一根轴盘绕，形成右手双螺旋结构。螺旋结构上有大沟和小沟。 ⅱ.磷酸和脱氧核糖基：螺旋外侧，3 ′5 ′-磷酸二酯键连接，形成DNA分子的骨架。 嘌呤碱和嘧啶碱基： 螺旋内侧，碱基环平面与螺旋轴垂直，糖基环平面与碱基环平面成90°角。各碱基对平面彼此平行,互相重叠,呈板状堆积。 ⅲ.双螺旋内部碱基严格配对： A与T结合（两个氢键）；G与C结合（三个氢键） ——碱基互补。 ⅳ.螺旋横截面直径约为2 nm，每条链相邻两个碱基平面间距离为0.34 nm，夹角为36°，每10b形成一个螺旋，其螺矩（即螺旋旋转一圈）高度为3.4 nm。 Ⅴ.DNA双螺旋稳定因素 生理条件下很稳定。 维持稳定性的主要因