第十二章 DNA复制.pptVIP

本章内容 DNA复制基本概念和基本特征 DNA复制的酶和蛋白质 DNA复制的过程 DNA的损伤与修复 DNA的突变 单核苷酸多态性(SNP) DNA复制的一般特征 以原来的DNA两条链作为模板，四种dNTP为前体，还需要Mg2＋ 作为模板的DNA需要解链 半保留复制 需要引物——主要是RNA 复制的方向始终是5′→3′ 具有固定的起点 多为双向复制，少数为单向复制 半不连续性 具有高度的忠实性和进行性 一、半保留复制的实验依据和意义 DNA生物合成时，母链DNA解开为两股单链，各自作为模板(template)按碱基配对规律，合成与模板互补的子链。子代细胞的DNA，一股单链从亲代完整地接受过来，另一股单链则完全重新合成。两个子细胞的DNA都和亲代DNA碱基序列一致。这种复制方式称为半保留复制。 三、双向复制 原核生物复制时，DNA从起始点(origin)向两个方向解链，形成两个延伸方向相反的复制叉，称为双向复制。 真核生物每个染色体有多个起始点，是多复制子的复制。 习惯上把两个相邻起始点之间的距离定为一个复制子(replicon) 。复制子是独立完成复制的功能单位。 二、DNA聚合酶 全称：依赖DNA的DNA聚合酶 (DNA-dependent DNA polymerase) 简称：DNA-pol 一、以大肠杆菌为代表的“θ-复制”系统 DNA复制的起始——起始于OriC的识别，结束于引发体的形成 DNA复制的延伸 （1）复制体的形成 （2）前导链合成 （3）后随链合成 （4）前导链合成和后随链合成之间的协调 DNA复制的终止和子代DNA的分离 二、真核细胞的DNA复制 真核细胞的DNA复制在很多方面与原核细胞极为相似，但也有几点不同于原核细胞的地方： （1）需要解决核小体和染色质结构对DNA复制构成的障碍； （2）复制叉移动的速度远低于原核细胞； （3）具有多个复制子，这可以弥补复制叉移动速度低对整个DNA复制速度的制约； （4）冈崎片段的长度小于原核细胞； （5）复制被限制在细胞周期的S期，并受到严格的调控； （6）在第一轮复制结束之前不可能进行第二轮复制，而原核细胞在第一轮复制还没有结束的时候就可以进行第二轮复制； （7）需要端聚酶解决染色体DNA末端复制问题。 ? 细胞能否分裂，决定于进入S期及M期这两个关键点。G1→S及G2→M的调节，与蛋白激酶活性有关。 ? 蛋白激酶通过磷酸化激活或抑制各种复制因子而实施调控作用。 ? 真核生物每个染色体有多个起始点，是多复制子复制。复制有时序性，即复制子以分组方式激活而不是同步起动。 ? 复制的起始需要DNA-polα（引物酶活性）和polδ（解螺旋酶活性）参与。还需拓扑酶和复制因子(replication factor, RF)。 DNA复制的高度忠实性 （1）四种dNTPs浓度的平衡 （2）DNA聚合酶的高度选择性 （3）DNA聚合酶的自我校对 （4）错配修复 （5）使用RNA作为引物 本章小结 DNA复制过程 参与复制的酶和蛋白质 DNA的损伤:UV,化学 DNA修复:光活化修复,切除,甲基化指导 DNA突变 SNP 3? 5? 5? 3? 领头链 3? 5? 3? 5? 亲代DNA 随从链 引物 核小体 （二）复制的延长 染色体DNA呈线状，复制在末端停止。 复制中冈崎片段的连接，复制子之间的连接。 染色体两端DNA子链上最后复制的RNA引物，去除后留下空隙。 （三）复制的终止 5? 3? 3? 5? 5? 3? 3? 5? + 5? 3? 3? 3? 3? 5? 5? 端粒(telomere) 指真核生物染色体线性DNA分子末端的结构。 功能 ? 维持染色体的稳定性 ? 维持DNA复制的完整性 结构特点 ? 由末端单链DNA序列和蛋白质构成。 ? 末端DNA序列是多次重复的富含G、C碱基的短 序列。 TTTTGGGGTTTTGGGG… 端粒酶(telomerase) 端粒酶RNA (human telomerase RNA, hTR) 端粒酶协同蛋白(human telomerase associated protein 1, hTP1) 端粒酶逆转录酶(human telomerase reverse transcriptase, hTRT) 组成 端粒酶的催化延长作用 爬行模型 DNA聚合酶复制子链 进一步加工 滚环复制(rolling circle replication) 三、滚环复制和D环复制 是某些低等生物的复制形式，如?X174和M13噬菌体等。 滚环复制 dNTP DNA-pol γ D环复制(D-loop replication) 是线粒体DNA (mitochondrial DNA，mtDNA)