白藜芦醇对UVA辐射人体成纤维细胞影响.pdf

目 录 一、摘要 中文论著摘要…………………j……．．…………………里 英文论著摘要……………………………………………一4 二、英文缩略语……………………………………………．．7 三、论文 论文一 前言…………………………………………………．．8 研究资料与方法………………………．…………………9 实验结果………………………………………………13 讨论…………………………………………………．17 结论……………．．…………………………………．．19 本研究创新性的自我评价………………．．………………．．20 论文二 前言………………………………．．………………．．21 研究资料方法…………………………………………．．22 实验结果……………………………．………………．．30 讨论…………．………………………………………4l 结论………………………………．…………………44 本研究创新性的自我评价……………．．……………．……．46 四、参考文献……．……………………．．．………………．．47 五、附录 综述………………………………．．……………．．．．．52 在学期间科研成绩……．．．…．．………．．．．………………．62 致谢．．．．．．．．…………………．．．．…．．．．．．．．……．．．．．．．．63 个人简介…………………………．…………………．．64 ·中文论著摘要· 白藜芦醇对UVA辐射的人体成纤维细胞的影响 目的 波紫外线(Ultraviolet 所有的UVC完全被平流层的臭氧吸收。UVA与UVB辐射均可与皮肤光损伤有 关，但UVA的剂量是UVB的10．1000倍，并且能够透入皮肤深层，因此我们此 次研究选择UVA和皮肤成纤维细胞作为皮肤光损伤的分子水平研究基础。 皮肤光损伤在外观上主要表现为：皮肤粗糙、松弛、皱纹、不规则色斑和毛 细血管扩张，严重者发展为皮肤癌，故防护UVA，延缓光损伤日益受到人们的关 注，已经成为人们日常生活重要方面，但UVA引起皮肤发生光损伤的具体机制 尚不清楚，我们研究UVA辐射对体外培养的人皮肤成纤维细胞形态、增殖活性 及几．1a、IL．1B、IL．6蛋白水平的影响，初步探讨UVA致人皮肤成纤维细胞损伤 辐射后人体成纤维细胞增殖活性及转录因子-KB(nuclearfactor-r,B，NFr。B)、基质 金属蛋白酶(mauix mRNA的表达水平 metalloproteinases，MMPs)、IL．113、IL．6 和也．1a、几．1p、IL．6的蛋白水平的影响，探讨白藜芦醇对UVA辐射致人皮肤成 纤维细胞损伤的光防护作用机制。 方法 取第四代对数生长期的人体成纤维细胞，分为空白对照组、低剂量辐射组、 中剂量辐射组及高剂量辐射组。接受辐射的三组细胞分别予1J／cm2、5J／cm2和 细胞形态、四甲基偶氮唑盐比色实验(MTT)法检测细胞的增殖活性、酶联免疫 吸附实验(ELISA)法检测培养上清液中几．1a、IL．1口、IL．6的蛋白水平。 另取第四代对数生长期的人体成纤维细胞，用MTT法检测0．01mmoFL、 MMP3、MMP9、TIMPl的mRNA水平。 结果 24h、48h、72h细胞的增殖活性均受抑制，其中以辐射后24h细胞增殖活性最低。 改变。中、高剂量UVA辐射后6h几．1a、m．1p、IL．6的蛋白水平显著高于空白 对照组，且几．1B、几．6持续高水平表达至辐射后48h-72h。 响，但0．5mmoFL、1．0mmol／L白藜芦醇显著抑制细胞的增殖活性，且浓度越大， 细胞增殖活性越低。0．01mmoFL白藜芦醇对UVA辐射后细胞增殖活性有明显的 保护作用，对各剂量UVA辐射后的IL．1a、IL．1D、IL．6的分泌有明显抑制作用。 0．01mmol／L白藜芦醇对5J／cm2UVA辐射后NFr．B mRNA的水平有明显抑制作用， 达48h，而0．1mmoFL白藜芦醇仅在6h表现出抑制NFr．BmRNA的水平作用