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TSA对绵羊卵母细胞体外培养的影响 摘要 本研究通过探讨TrichostationAXt绵羊卵母细胞体外成熟、体外受精、胚胎后期发育及 Trichostation A对经Brilliantblue染色液筛选后对BCB+萝g母细胞、BCB．卵母细胞后期 cresyl 发育的影响，为进一步研究胚胎发育过程中表观遗传调控机制和胚胎发育机理提供理论依据 。主要研究结果如下： 1．Ts似寸绵羊卵母细胞及孤雌胚胎发育的影响 nM 在胚胎培养液中分别添加0、50、100、200、300、500TSA，发现胚胎培养液中添 nM 力1300 TSA能显著提高绵羊孤雌胚胎的囊胚率及囊胚细胞总数(尸≮0．05)；TSA分别作用 0h、5h、15 nM h，发现胚胎培养液中添力1300TSA处理10h能显著提高绵羊孤雌胚胎的囊 nMTSA 胚率(p0．05)：与体外胚胎培养液阶段添]JIITSA相比，在体外成熟液阶段添力1300 作用10h可降低卵母细胞体外成熟率及孤雌胚胎的后期发育能力。因此，在体外胚胎培养液 中添力1300nMTSA，作用10h，能显著提高绵羊卵母细胞孤雌胚胎的发育能力。 2．TSA对绵羊卵母细胞体外成熟及体外受精的影响 nlVt)，对绵羊卵母细胞 在卵母细胞体外成熟液中添加不同浓度TSA(0、50、100、200 颗粒细胞的扩展产生抑制作用，当体外成熟液中添加的TSA浓度达至U200nlVi时显著抑制了卵 母细胞的成熟及体外受精胚胎后期的发育能力：体外受精液中添加不同浓度TSA(0、100 、200、300 nM riM)，发现体外受精液中添力n200TSA能显著提高绵羊卵母细胞体外受精胚 nM h 胎的囊胚率及囊胚细胞总数(P．O．05)：体外受精液中添力n200TSA处理不同时间(0 、10h、24 h)后，结果处理10h能显著提高受精胚胎的囊胚率(P．O．05)；因此，在成熟液 中添加Ts敞寸卵母细胞的成熟及后期发育无显著作用，浓度增加到200nM，显著抑制卵母细 nM 胞成熟及后期发育能力，而在体外受精液中添力n200TSA作用10h则能显著提高受精胚胎 的发育能力。 3．TSA对经BCB筛选后卵母细胞体外胚胎发育的影响 uM 将绵羊卵母细胞置于26 BCB染色液中染色90mill后，卵母细胞胞质着蓝色为BCB+ ，胞质没有着色的为BCB．。分别将BCB+和BCB．卵母细胞进行孤雌激活和体外受精，结果 母细胞卵裂率和囊胚细胞总数显著低于BCB+组。在体外受精中，BCB+卵母细胞囊胚率和 VS 37．55％)和囊胚细胞总数(79．45100．29)显著低于对照组(尸．0．05)；将BCB．卵母细胞 nM 孤雌胚胎和受精胚胎分别置于300 TSA胚胎培养液中作用10h显著提高了BCB．卵母细胞 29．46％)(p0．05)； 孤雌胚胎囊胚率(23．33％VS35．65％)和受精胚胎囊胚率(19．36％VS