不同环境因素对拟轮生镰孢产毒和其FUM基因表达的影响.pdfVIP

摘要 玉米是世界三大作物之一，也是我国主要的饲料和粮食作物。玉米穗腐病是 一种严重影响玉米产量和品质的病害，其病原菌产生的伏马毒素严重影响玉米的 verticillioides) 食用性及可销售性。伏马毒素是一类主要由拟轮生镰孢(Fusarium 病和猪的肺水肿等致命病症，还能增加人类食道癌的风险。基于伏马毒素的毒性， 国际癌症研究署(IARC)已将FBl列为可能的致癌物质。本文明确了拟轮生镰孢在 PDA培养基上生物合成伏马毒素的最适温度、水活度及培养时间，建立了PDA 培养基中伏马毒素的测定方法；研究了不同温度和水活度对拟轮生镰孢GS—l菌 株生长、伏马毒素产生的影响，不同药剂浓度处理对拟轮生镰孢GS．1菌株生长、 伏马毒素产生的影响；研究了不同温度和水活度及药剂处理对FUM基因表达的 影响。研究结果如下： 明确了拟轮生镰孢在PDA中培养10d后，培养基中伏马毒素含量达到最大 值，菌株所产生的伏马毒素绝大部分溶解在了培养基中，少部分残留在茵丝中。 PDA培养基中伏马毒素以乙腈／水(V：V=3：1)为提取溶剂，然后60℃氮吹浓 缩，高效液相色谱．柱后衍生法测定。初步明确了在温度和水活度影响拟轮生镰 孢GS．1的生长及伏马毒素产生，其最适生长与产伏马毒素条件均为30℃和水 活度为0．99。用不同浓度苯醚甲环唑和戊唑醇处理，两个药剂均随着浓度的增高， 拟轮生镰孢GS．1的菌丝生长速率减慢，表明高浓度药剂对拟轮生镰孢的生长有 强抑制作用，两者的EC50值表明，苯醚甲环唑对拟轮生镰孢的毒力低于戊唑醇。 不同浓度的苯醚甲环唑和戊唑醇处理后，对拟轮生镰孢GS一1生物合成伏马毒素 表现出抑制或刺激作用。不同浓度的苯醚甲环唑对拟轮生镰孢GS-1生物合成伏 马毒素FBl和FB2均表现出一定的抑制作用。在苯醚甲环唑浓度为O．5“g／g~4p∥g 范围内，随着药剂浓度的提高，菌株产生伏马毒素FBl和FB2的量呈减少趋势， 抑制作用增强。但在苯醚甲环唑浓度为O．25I上g／g时FBl和FB2的浓度却低于高 浓度苯醚甲环唑处理，即该浓度对菌株产生伏马毒素的抑制能力高于其他供试浓 度。在不同供试浓度戊唑醇处理后，除浓度为O．25 ILLg／g处理，其他浓度的戊唑 醇处理均对拟轮生镰孢GS．1生物合成伏马毒素表现出抑制作用。高浓度戊唑醇 对拟轮生镰孢生物合成FBl和FB2具有较强的抑制作用。但在戊唑醇浓度为O．25 1、FUM21均在32 表达结果分析表明，在不同温度和水活度条件下，基因FUM 19则在30℃和水活度为O．99时 ℃和水活度为0．99时的表达量最低，而FUM 1 的表达量最低，并且与温度32℃和水活度O．99时的表达量接近。基因FUM 和FUM21在水活度O．95和32℃时表达量最大，分别是最低时表达量的近3倍 19则在30℃和水活度为0．95时的表达量最高，是表达量最 和2倍多；而FUM 1在浓度为1 低时的2倍。在含不同浓度苯醚甲环唑培养条件下，基因FUM p∥g 万方数据 时的表达量最低，基因FUM19和FUM 21在浓度为4u∥g时的表达量最低，3 个基因均在浓度为2 1分别是最低时表达量的1．5倍， gg／g时的表达量最高，FUM 而FUM19和FUM