GAP161联合顺铂对肿瘤增殖和凋亡的影响及机制研究.pdfVIP

GAPl 61联合顺铂对肿瘤增殖与凋亡的影响及机制研究 专业：药剂学 作者：张梦恰 导师：陈鹰 摘要 1研究背景和目的 恶性肿瘤严重威胁人类生命健康，其死亡率仅次心血管疾病[11。针对 肿瘤的治疗，临床主要采取手术切除、放射治疗与化疗的方式。其中，化 疗在癌症的治疗中占重要地位。理想的化疗是对肿瘤细胞有选择性的杀 伤，而对正常细胞无明显毒性，由于癌细胞与人正常组织细胞间缺乏根本 性的代谢差异，使大部分化疗药物的选择性较差，对肿瘤细胞的特异性不 高，毒副作用强烈，治疗效果不尽如人意。非特异性化疗药物顺铂就是其 中之一。其属于金属铂类制剂，适用于胃癌、乳腺癌、肺癌、头颈部癌、 前列腺癌等[21，是目前临床运用最广，作用最强的抗肿瘤药物之一[3】，但 由于毒性作用较大，剂量的增加往往导致不良反应的增多，长期反复使用 易产生多药耐药等，使其临床应用受到一定的限制。因此，如何解决顺铂 毒性大，减轻其严重的耳肾毒性，提高药物的疗效，已成为肿瘤科亟待解 决的实际问题。针对以上问题，研究者们开展了多方面的研究。如多方式 的联合用药，靶向药物的研制等。 G3BP属于RNA结合蛋白家族成员，是一种RasGAPSH3结构域段特 异性结合蛋白，其参与Ras的下游传导通路。G3BPN一端都具有NTF2样结 具有GTPase活性，通过受体酪氨酸激酶激活信号传导级联反应。Ras信号 途径参与多种细胞活动，包括细胞生长、分化、细胞骨架的形成和蛋白转 运等。RasGAP可促进Ras RasGDP，从而达到负性调节弛s的活性。基于以上研究和认识，人们推断 的。 本研究目的在于通过多种实验方法不同角度初步探讨P．,(G3BPYq靶点 所设计的全新多肽药物GAPl61联合顺铂对肿瘤增殖与凋亡的影响，为进 一步挖掘二者联合用药在抗肿瘤方面存在的潜能提供理论依据。 2研究方法 GAPl61单用及联合顺铂对细胞增殖的影响。 及联合顺铂对乳腺癌MA一782细胞凋亡的影响。 采取最大剂量单次给药来评价GAPl61的安全性。 建立小鼠乳腺癌肿瘤模型，通过绘制瘤体生长曲线，称瘤重，观察药 物对小鼠移植瘤生长的影响，从而计算抑瘤率。 运用HE染色的手段，观察各处理组药物对小鼠瘤体及肝、肾、脾相 关内脏病理学的改变。采用免疫组化的方法，检测药物对小鼠移植瘤细胞 凋亡相关蛋白表达的影响。 3研究结果 1、GAPl61和顺铂对多种肿瘤细胞均有剂量依赖性的抗增殖作用。联合 给药组表现为协同作用，较顺铂组比较差异有统计学意义①o．05)，在相 同的抑癌效果下可降低顺铂的使用量；且在相同浓度梯度下，联合用药组 对Panc一1的抑制效果较差，对MA一782效果最好。 2、倒置显微镜观察，联合用药组细胞与顺铂组相比，MA一782细胞形态改 组细胞凋亡形态特征与顺铂组相比更为显著，染色质凝集现象增多；流式 细胞术检测显示，与顺铂组相比，联合给药组细胞早期凋亡率显著升高， 伊0．05)。 3、急性毒性试验结果表明，多肽GAPl61对小鼠无明显急性毒性作用。 61联合顺铂组抑瘤率分别为：5．37％，38．63％， 4、GAPl61组，顺铂组，GAPl 细胞均发生部分坏死、核固缩且联合用药组愈加明显。小鼠主要内脏器官 HE染色结果表明，GAPl61在增强顺铂化疗疗效的同时并未增加其毒副 作用。免疫组化结果证实，联合给药组与GAPl61组，顺铂组及阴性对照 达显著增强，且具统计学意义(Po．05)。 4结论 GAPl61联合顺铂在体外对多种肿瘤细胞具抗增殖效应，且两药联合 瘤的生长，并增强顺铂对小鼠MA一782细胞移植瘤的抑制作用，此作用机 关键字：多肽GAPl61；顺铂；抗肿瘤；体外实验；体内实验 III AReseachabouttheEffectofGAPl61Combinedwith on Cisplatin Proliferafionand ofCancerandItsMechanism Apoptosis Speciality：PharmaceuticalAnalysis