第四组、色质联机研讨.ppt

色质联机;4;一、概述;第一节、概述;◆液质联用与气质联用的区别: ?气质联用仪(GC-MS)是最早商品化的联用仪器，适宜分析小分子、易挥发、热稳定、能气化的化合物；用电子轰击方式（EI）得到的谱图，可与标准谱库对比。 ?液质联用(LC-MS)主要可解决如下几方面的问题：不挥发性化合物分析测定；极性化合物的分析测定；热不稳定化合物的分析测定；大分子量化合物（包括蛋白、多肽、多聚物等）的分析测定；没有商品化的谱库可对比查询，只能自己建库或自己解析谱图。 ;◆联用方式：  ?离线：一种仪器操作完成后将试样收集起来，再进行另一种仪器测定。较易实现，但费时费力且易导致样品失真； ?在线：两种仪器通过接口在线连接在一起，不同仪器既可独立使用，也可联机使用； ?嵌入：将不同的仪器作为一个整体，以一种新的仪器出现。是一种理想的方式。;◆联用的意义： 各种分析方法，由于本身所固有的一些原因，在方法的选择性、灵敏度、应用范围等方面总有一定的局限性。不同仪器方法的联用，特别是将一种分离手段与一种检测技术的联用，不仅有可能将各自的优势汇集起来，取长补短，克服其不足之处，从而大大提高分析仪器的性能，扩大应用范围，同时还可能获得两种手段各自单独使用时所不具备的某些功能。因此，联用分析技术已成为当前仪器分析和分析仪器发展的主要方向之一。; 色谱质谱的在线联用将色谱的分离能力与质谱的定性功能结合起来，实现对复杂混合物更准确的定量和定性分析。而且也简化了样品的前处理过程，使样品分析更简便。; ◆色谱联用技术的目的： ?提高分辨率—— ?提高灵敏度—— ?实现形态分析—— ?扩大仪器的功能—— ?拓展仪器的应用范围——;液相色谱-质谱联用仪;气相色谱-质谱联用仪;二、原理;第二节、原理; ◆接口 将色谱与质谱通过一种称为“接口”（Interface）的装置直接联接起来，将通过色谱仪分离后的各种组分，逐一通过接口送入到第二种仪器中进行分析。将两种分析仪器的分析方法在线结合起来。 因此，接口是色谱联用技术中的关键装置，它要协调前后两种仪器的输出和输入间的矛盾。要求既不影响前一级色谱仪器对组分的分离性能，又能同时满足后一级仪器对样品进样的要求(分离掉流动相）和仪器的工作条件（真空度）。 ; ◆接口的作用： 1.调节两仪器的操作压力。色谱柱出口为常压，质谱仪内为高真空系统，通过接口控制压力。 2.起分离器的作用。抽走从色谱柱来的载气，保 留小分子碎片进入质谱仪的离子室。 ;◆接口存在的主要技术问题 在GC-MS联用中，主要问题是工作气压。通常色谱柱的出口气压为100 kPa左右，而质谱仪却在低于10-3 Pa真空下操作，所以必须有一个接口系统将载气压强降低约8个数量级，并将样品送入，或经浓缩后送入质谱仪，以保证两种仪器都能在所需正常的条件下操作。 ;◆对接口的一般要求： ?可进行有效的样品传递，通过接口进入下一级仪器的样品量应不少于全部样品的30%，以保证整个联用仪器的灵敏度； ?样品的传递应具有良好的重现性，以保证整个分析的精密度； ?接口应满足两级仪器任意选用操作模式和操作条件； 样品通过接口时不应发生化学变化，如果发生化学变化，则要遵循一定规律，以便推断化学变化前的组成和结构； ?接口应保证不影响前级色谱的分离柱效； ?接口本身的操作应简单、方便和可靠。;◆扫描速度 一般质谱仪对扫描速度的要求不高。但如果与气相色谱联用，由于气相色谱峰很窄，有的仅几秒钟时间，一个完整的色谱峰通常需要至少6个以上数据点，这样就要求质谱仪有较高的扫描速度，才能在很短的时间内完成多次全质量范围的质量扫描。 另一方面，要求质谱仪能很快地在不同的质量数之间来回切换，以满足选择离子检测的要求。;三、常见术语;第三节、常见术语 ?质荷比: 离子质量(以相对原子量单位计)与它所带电荷(以电子电量为单位计)的比值,写作m/Z. ?峰: 质谱图中的离子信号通常称为离子峰或简称峰. ?离子丰度: 检测器检测到的离子信号强度. ?基峰: 在质谱图中，指定质荷比范围内强度最大的离子峰称作基峰. 总离子流图；质量色谱图；准分子离子；碎片离子；多电荷离子；同位素离子 ; 1.0;◆准分子离子:;◆碎片离子：;◆多电荷离子：;四、应用;◆气质联用（GC-MS）的应用领域：