6色谱分析导论.ppt

第6章 色谱分析方法导论 Chromatography 6.1 概述 历史、色谱分离过程、分类 6.2 色谱流出曲线 色谱图及相关术语 6.3 色谱法基本原理 描述分配过程参数、峰间距、峰形状和峰宽的理论描述(塔板理论及速率理论) 6.4 分离度及色谱分离方程 分离度及色谱分离方程、影响分离的因素;6.1 概述 化学分析方法的基本要求是其选择性要高。即，在分析过程中，待测物与潜在的干扰物的分离是最为重要的步骤！ 20 世纪中期，大量采用一些经典的分离方法：沉淀、蒸馏和萃取。 现代分析中，大量采用色谱和电泳分离方法。迄今为止，色谱方法是最为有效的分离手段！其应用涉及每个科学领域。 1903年，由俄国植物学家Mikhail Tswett 最先发明：他采用填充有固体CaCO3细颗粒物的玻璃柱，将植物色素的混合物（叶绿素和叶黄素chlorophylls xanthophylls）加于柱顶端，然后以溶剂淋洗，被分离的组份在柱中显示了不同的色带，他称之为色谱 （希腊语中 “chroma”=color; “graphein”=write） 。 50年代，色谱发展最快（一些新型色谱技术的发展；复杂组分分析发展的要求。 1937-1972年，15年中有12个Nobel奖是有关色谱研究的！;色谱分离基本原理： 使用外力使含有样品的流动相（气体、液体或超临界流体）通过一固定于柱或平板上、与流动相互不相溶的固定相表面。由于处于柱起始端样品中各组份与两相（流动相与固定相）的作用程度不同，因此，与固定相作用强的组份随流动相流出的速度较慢，而与固定相作用弱的组份随流动相流出的速度较快。由于流出的速度的差异，使得混合组份最终形成各个单组份的“带(band)”或“区(zone)”，对依次流出的各个单组份物质可分别进行定性、定量分析。 ;色谱分类方法： 1. 按固定相外形分： 柱色谱（填充柱、空心柱）、平板色谱。 2. 按组份在固定相上的分离机理： 吸附色谱：不同组份在固定相的吸附作用不同； 分配色谱：不同组份在固定相上的溶解能力不同； 离子交换色谱：不同组份在固定相（离子交换剂）上的亲和力不同； 凝胶色谱（尺寸排阻色谱）不同尺寸分子在固定相上的渗透作用。;3. 按色谱动力学过程分类 a 淋洗色谱法： 以与固定相作用弱的组分为流动相，组分按照与固定相作用力、吸附力或溶解力的差异，由弱到强先后洗出。这种方法是最为广泛的色谱方法。 b 置换色谱法： 是指样品输入色谱柱后, 用一种与 固定相作用力极强的置换剂通入色 谱柱, 去替代结合在固定相表面的 溶质分子。置换色谱有明显的优点, 即上样量大、产率高、而且易于操作。 c 迎头色谱法： 以试样混合物为流动相，与固定相作 用力弱的组分最先以纯物质状态流出， 此方法适用于少数几个组分混合物的 分离，纯化。处理样品量大如活性炭 过滤、制备去离子水等。;4. 按两相状态分;色谱法的特点： 首先是一种分离分析方法，定量分析准确； 与精馏，萃取相比，具有速度快，效率高，选择性好的特点，但样品处理量少； 可用于分离沸点相近，物理化学性质相似的同系物、同分异构体、对映异构体等； 可以解决化学分析不能用于复杂组成样品的分析； 将色谱仪和光谱仪、质谱仪联用，可以解决更多的分析任务，是当今仪器分析发展的方向。 ;6.2 色谱流出曲线（色谱图） 混合组分的分离过程及检测器对各组份在不同阶段的响应;色谱术语： 1）基线：在实验条件下，色谱柱后仅有纯流动相进入检测器时的流出曲线称为基线，S/N大的、稳定的基线为水平直线。 2）峰高：色谱峰顶点与基线的距离。; b. 保留时间tr：试样从进样到出现峰极大值时的时间。它包括组分随流动相通过柱子的时间t0和组分在固定相中滞留的时间。 c. 调整保留时间 ：某组分的保留时间扣除死时间后的保留时间，它是组分在固定相中的滞留时间。即 保留时间为色谱定性依据，但同一组分的保留时间与流速有关，因此有时需用保留体积来表示保留值。 d. 死体积V0：色谱柱管内固定相颗粒间空隙、色谱仪管路和连接头间空隙和检测器间隙的总和。勿略后两项可得到： 其中，Fco为柱出口的载气流速（mL/min)，其值为： F0-检测器出口流速；Tr-室温；Tc-柱温；p0-大气压；pw-室温时水蒸汽压。; e. 保留体积Vr：指从进样到待测物在柱后出现浓度极大点时