基因工程课件2.pptVIP

考点一　基因工程的应用;　　类型 项目　　　;　　　类型 项目　　　;2．基因治疗 (1)概念：是把 导入病人体内，使该 发挥功能，从而达到治疗疾病的目的，是治疗人类遗传病最有效的手段。 (2)成果：将腺苷酸脱氨酶基因转入患者淋巴细胞中，治疗复合型免疫缺陷症。 (3)方法：a、 ：先从病人体内获得 ，如T淋巴细胞，进行培养。然后，在体外完成基因转移，再筛选成功转移的细胞扩增培养，最后重新输入患者体内。 b、体 内 基 因 治 疗：直 接 向 人 体 组 织 细 胞 中 的治疗方法。如1994年美国科学家利用经过修饰的腺病毒作载体，成功地将治疗遗传性囊性纤维化病的正常基因转入患者肺组织中。;【知识拓展】;【典例精析】;(3)采用 PCR 技术可验证干扰素基因是否已经导入 家 蚕 细 胞。该 PCR 反 应 体 系 的 主 要 成 分 应 该 包含：扩 增 缓 冲 液 (含 Mg2＋)、水、4 种 脱 氧 核 苷 酸、模 板 DNA、 和 。 (4)利用生物反应器培养 家 蚕 细 胞 时，贴 壁 生 长的 细 胞 会 产 生 接 触 抑 制。通 常 将 多 孔 的 中 空 薄 壁 小 玻 璃 珠 放 入 反 应 器 中，这 样 可 以 ，增加培养的细胞数量，也有利于空气交换 。;【考查类型】本题主要考查对基因工程应用的理解和动物细胞培养相关的基础知识。 【解析】 (1)为了使组织分散开为单个细胞，通常用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理。(2)启动子位于目的基因的首端，终止子位于目的基因的尾端。(3)PCR反应体系的主要成分应包括扩增缓冲液(含Mg2＋)、水、4种脱氧核苷酸、模板DNA 、Taq DNA聚合酶、两种引物。(4)细胞离体培养时通常表现出贴壁生长和接触抑制，多孔的中空薄壁小玻璃珠能增大贴壁生长的附着面积，增加培养的细胞数量。 【方法归纳】解答这类问题时，要注意将基因工程的步骤与细胞培养、细胞分化等知识相联系。;考点二　蛋白质工程;【知识拓展】;【典例精析】;考点三　DNA的粗提取与鉴定;(2)利用DNA对酶、高温和洗涤剂的耐受性原理来粗提取DNA： 能专一性的水解蛋白质而不会对DNA产生影响，故可用 处理达到粗提取DNA的目的；60～80℃ 的高温会使大多数 ，而DNA在80℃以上才会变性，故可用60～80℃的高温处理材料以达到粗提取DNA的目的； 能够瓦解细胞膜，但对DNA没有影响，故可用该试剂来使细胞破裂，更好的提取DNA。 综上所述：不同浓度的 、 、 、60～80℃的 及 均可用来提取DNA。;2．DNA鉴定的原理 在 条件下，DNA遇二苯胺呈现 ，因此， 可以作为鉴定DNA的试剂。 原理总结：通过利用不同浓度NaCl溶液溶解或析出DNA，可以从细胞中提取和提纯DNA；再利用酒精进一步将DNA与蛋白质分离开来，达到提纯的目的；最后利用二苯胺试剂鉴定提取的物质是否是DNA。;3．实验设计 (1)实验材料的选取：不同生物的组织中DNA含量不同。在选取材料时，应本着 、材料易得、便于提取的原则。 (2)破碎细胞，获取含DNA的滤液：如果选用鸡血作材料，可在鸡血细胞液中加入一定量 (作用是 )，并用玻棒搅拌，过滤后收集滤液；如果用洋葱作 材 料，则 要 先 切 碎 洋 葱，加 入 一 定 量 洗 涤 剂 和 食 盐 ( 洗 涤 剂 能 ；食盐能溶解 )