PAX2和AIB1基因在乳腺癌他莫昔芬耐药机制中的作用的实验研究.pdfVIP

肌青链霉素的??．???螅?俑??州?敬???，同法将??本实验采用人乳腺癌???和??／??种细胞株。人乳腺癌???细胞。分别给予溶剂对照?．?％的无水乙醇??叫的?????及??在乳腺癌他莫昔芬耐药机制中的作用的实验研究摘要乳腺癌是全球女性最常见的恶性肿瘤，严重危害着女性的生命和健康。近年来我国乳腺癌的发病率持续上升，且发病年龄呈年轻化。内分泌治疗以其副作用小、效应持久，成为乳腺癌最重要的治疗手段之一。他莫昔芬是一种选择性雌激素受体调变剂，用于绝经前雌激素受体阳性的乳腺癌患者的内分泌治疗。目前临床上约?％雌激素受体???????粜缘娜橄侔┗颊叨钥勾萍に刂瘟撇??鸵???咛寤?粕胁幻魅贰???基因定位于人类?号染色体长臂的??带?????浔?码成对基因盒??渥钤绱庸??蟹⑾郑?蝗衔J且职┗?騑?的转录抑制因子。前期的回顾性研究表明，配对盒基因???和??与??的表达水平相关，而抗雌激素治疗的代表药物他莫昔芬耐药的乳腺肿瘤特征为??高表达；目前有关??和??在乳腺癌内分泌治疗耐药机制中的研究鲜有报道。鉴于此，本文对??和???诖萍に厥芴逖粜?的乳腺癌细胞中的表达及其调控??表达的相关机制进行了较为系统的实验研究，为他莫昔芬耐药机制的相关研究提供了分子生物学基础。方法：?赴?嘌?氪?????细胞常规培养在含有??ヌヅＱG濉?培养基中，置于含???的?摄氏度恒温恒湿培养箱中培养。采用????て诒┞斗ㄓ盏汲鋈巳橄侔㎝??疶??切停?渑嘌?跫??理????针对??的抑制剂?????ご??．?。???椭柿ＷH?分别用????阴性对照????蚉?????H綧?．?赴????H綧??疶??中文摘要目的：???????? 而低浓度??訫??疶?∠赴?氏殖龃碳ぴ鲋档淖饔茫?吲ǘ萒??臫?处理???和??／??细胞对??、??及??进行实验研究。分别用?冶泶顰??闹柿：妥魑R跣远哉盏目赵靥逯?提取细胞总蛋白，用蛋白免疫印迹方法检测各蛋白的表达情况，再通粒转染???细胞中，再给予?处理????ń玃??柿ＷH???／??细胞并处理。?鞍酌庖哂〖?????过????上裣低辰?邢陨ú⒎治鍪?荨??凳倍?縋????????提取细胞的总??醋B嘉猚???檬凳倍?縋?检测人乳腺癌???和??／??细胞中??、??、????表达情况，并用????低辰?蟹治觥???壬ǚú舛ㄏ赴?鲋????蛑柿ＷH驹俑?鑄?处理后，分别收集各组细胞，用??处理后利用多功能酶标仪测定各个孔在???Φ腛?担?捶从ο赴??殖情况。?臣蒲Х治?采用????甇?砑??惺?莘治觯?骄??冉系膖检验分析和单因素方差分析?????????，???，数据用??表示，每组实验不少于?味懒⒀?镜闹馗矗?煅橐訮?．?为差异有显著性意义。结果：??、??、??在人?阳性乳腺癌细胞中的表达情况??????检测结果表明，??、??、??蛋白在雌激素受体阳性的乳腺癌???及??／??细胞中均表达。在???细胞的两种亚型中，??／??细胞中??蛋白的相对表达量低于野生型???细胞，而??蛋白表达较高，二者??表达差异无统计学意义。???矶匀橄侔┫赴?鲋臣癆?????癏??鞍妆泶锏挠跋????矶匀橄侔┫赴?鲋车挠跋???治鼋峁?核孀臫?浓度的升高，???细胞增殖逐渐降低；呈现出抑制作用。蛋白表达情况的影响???中文摘要??．????? 入???砗螅琍???????橹写??鞍子隤????．?聊琍???蚨匀橄侔┫赴鸗?治疗敏感性的影响??．??峁?允荆篜??柿????碜橄赴?蠬????检测结果显示，与空载质粒???橄啾龋琍??柿???橹蠬????利用??魽干扰技术，体外观察??在乳腺癌中的作用?．??＝峁?崾荆琍???虻某聊???薚?引起的???细胞???砬昂螅?贛?．?赴?校琓?刺激后??表达显著升高，??、??表达降低，差异具有统计学意义??．??６????／??细胞中，??碳な沟肏????????鞍妆泶锞??显著性差异??．?????在乳腺癌中的生物学功能研究??．?聊琍??訲?刺激下???细胞??、??表达的影响??峁?允荆?贛?．?赴?校琍????????理组细胞中????的表达水平与??????????碜槲尴?著差异俾?．????????结果显示，与?????????橄啾龋??????橹蠬??诘鞍姿?缴系南喽员泶锪课尴灾?钜????转录抑制和??蛋白表达降低。在???细胞中，沉默??之后，??????检测结果显示，加???????橄啾缺泶锼?浇档唾????。??觳饨峁?砻鳎琈?一?赴?H綪??????俑?鑄?处理后?小时后，可见细胞增殖活性较??????组差异无统计学意义∽?．??Ｊ褂谜攵訦??奶匾煨宰瓒霞晾?撂婺嵩ご?砗螅琈?．?细胞沉默??给予???砗蠼衔锤?枥?撂婺岽?淼南赴?赴?鲋?明显受到抑制。??