3遗传重组与转座(第3节至第4节)资料.pptVIP

DNA的转座（DNA transposition）;主 要 内 容;;2 转座子的定义; （1） 基因组内移动； （2） 不依赖于供体与受体间的序列关系； （3） 一般仅移动转座子序列本身。 ; 3.1 插入序列（IS,简单转座子） Simple transposon （ insertion sequence） 结构特征 和 转座特点 3.2 复合转座子 (Composite transposon) 结构特征 和 转座特点;插入序列（IS）的结构特征 ;In this example, the target is a 5 bp sequence. The ends of the transposon consist of inverted repeats of 9 bp. ;插入序列的转座特点;复合转座子的结构特征;A composite transposon has a central region carrying markers flanked by IS modules. ;◆通常情况，可以作为一个整体进行转座； ◆极少情况，含有的一个或两个IS元件也可进行单独转座。;所有转座子的共同机制： 在靶DNA上造成交错切口，转座子与突出的末端相连，填补缺口。 ;; 跟据转座子的移动机制，可分为： ◆复制型转座（replicative transposition） ◆非复制型转座（nonreplicative transposition） ◆保守型转座（conservative transposition）;复制性转座：转座子作为可移动的元件被复制，一个拷贝保留在供体原来的部位不变；另一个拷贝则插入到受体的位点上，结果供体和受体都有一个转座子的拷贝。 ;非复制型转座：转座子从供体一个位点转移到受体新位点处，供体位点留下缺口，受到损伤（严重时致死）或宿主修复系统识别修复。; 保守型转座：转座过程中，转座子没有被复制，插入到受体位点时保持核苷酸的保守性。与λ整合机制相似，也能够携带供体的DNA进入到受体DNA中。 ;转座引起插入突变; 造成插入位点靶DNA的少量碱基对重复； 插入位点出现新基因； 引起染色体畸变； 切除效应； 外显子改组;① 转座引起插入突变 IS、Tn 和 Mu 噬菌体都可能引起插入突变。插入位点若在一个基因的前端功能基因中，可能造成移码或终止密码突变。;② 造成插入位点靶DNA的少量碱基对重复IS1、Tn10： 造成9bp的重复。 IS3： 造成3或4bp的重复。 IS4： 造成11bp的重复。;③ 插入位点出现新基因 复合转座子带有抗性基因（如抗药性基因ampc)，可产生两方面效应：一个基因的插入突变；出现抗药基因。 ;④ 引起染色体畸变 在一个染色体上（甚至不同染色体上）若有同一转座子的两个拷贝，其提供的相同重组位点，可导致缺失、倒位、插入。 方向相同：产生缺失。 方向相反：发生倒位。;;通过转座子介导的姐妹染色单体间的染色体内异位交换 ;⑤ 切除效应 指转座子从原来位置上消失。准确切除：使原插入发生恢复突变。不准确切除：留下转座子残迹，产生插入突变，但转座子标志消失。;转座子切离所造成的序列变异 ; ⑥外显子改组 当二个转座子被同一转座酶识别而整合到染色体的邻近位置时，则位于它们之间的序列有可能被转座酶作用而转座，如果这DNA序列中含有外显子，则被切离并可能插入另一基因中，这种效应称为外显子改组(exon shuffling)( 图)。 外显子改组将导致基因组中新基因的产生。 ;双转座子插入所引起的外显子改组示意图 ; 8、真核生物的转座成分; Ac和Ds这两个因子都位于玉米的第九号染色体短臂，在色素基因C的附近。 Ac因子全长4.5kb，有5个外显子，其产物是转座酶。Ac因子两端是长11bp的反向重复序列(IR)； Ds因子长0.4-4kb，它的中间(在转座酶基因中)有许多种长度不??的缺失, 如Ds9只缺失194bp，而Ds6则缺失2.5kb，Ds的两端也都有11bp的反向重复序列。 Ac和Ds的末端反向重复几乎是一样的，只有一个不同之处：Ac两端最外边的核苷酸是彼此不互补的T:G，而Ds是互补的T:A(图)。 ; 　Ac-Ds转座元件结构示意图。右边示Ac及Ds元件的单链DNA末端反向重复配对所形成的茎环结构，这种结构可能对转座有意义; 由于缺失转座酶，Ds因子不能自主移动，因此Ds因子是非自主