【生物】43酵母菌细胞的固定化(人教版选修1)资料.ppt

第三章 酶的应用技术实践第二节 制备和应用固定化酶;酶制剂存在的缺陷： 1、通常对强酸、强碱、高温和有机溶剂等条件非常敏感，容易失活； 2、溶液中的酶很难回收，不能被再次利用，提高了生产成本； 3、反应后会混在产物中，可能影响产品质量。; 如果你是工程技术人员，你如何解决这个问题？;1、解决酶应用中存在问题的方法是？ 2、这种方法的优点是什么？ 3、制备固定化酶的方法有哪些？ ;1、固定化酶技术。即将酶固定在一定空间内的技术（如固定在不溶于水的载体上）。;3、固定化酶的制备方法主要有：; 在生产实际中使用固定化酶技术有无不足?如有不足,怎么办?;二、固定化细胞技术的应用;2.将酶或细胞固定化的方法;酶和细胞固定方法的选择;3、固定化细胞常用的载体; 如果反应底物是大分子物质，能否用固定化细胞技术? 为什么？ 那应该采用何种技术?;练习： 1、使用固定化细胞的优点是( )。 A.能催化大分子物质的水解 　 B.可催化一系列化学反应 C.与反应物易接近 　 D.有利于酶在细胞外发挥作用;2、酶的固定方法不包括( )。 A.将酶吸附在固体表面上 B．将酶相互连接起来 C．将酶包埋在细微网格里 D．将酶制成固体酶制剂，如加酶洗衣粉中的酶;3、如果反应物是大分子物质，采用那种方法催化受限制( )。 A．直接使用酶 B．使用化学方法结合的酶 C．使用固定化细胞 D．使用物理吸附法固定的酶;4、下列关于酶和细胞的固定叙述不正确的是( )。 A．酶分子很小，易采用包埋法 B．酶分子很小，易采用化学结合或物理吸附法固定的酶 C．细胞个大，难被吸附或结合 D．细胞易采用包埋法固定;5、关于固定化酶的叙述不正确的是 ( )。 A．既能与反应物接触，又能与反应 物分离 B．固定在载体上的酶可被反复利用 C．可催化一系列反应 D．酶的活性和稳定性受到限制;6、固定化细胞对酶的活性影响最小，根本原因是( )。 A．避免了细胞破碎、酶的提取纯化过程 B．固定化细胞在多种酶促反应中连续发挥作用 C．促化反应结束后，能被吸收和重复利用 D．细胞结构保证了各种酶在细胞内化学反应中有效的发挥作用;（1）制备过程包括哪几个步骤？ （2）你认为哪个步骤的操作是最重要的一环？;1、酵母细胞的活化; ;活化： 让处于休眠状态的微生物重新恢复正常的生活状态； 本质： 加快新陈代谢； 方法： 加入适量的水。 ;取1g干酵母，放入50ml的小烧杯中，加入蒸馏水10ml，用玻璃棒搅拌，使酵母细胞混合均匀，成糊状，放置1h左右使其活化;思考： 你认为酵母的活化操作有哪些注意事项？ 1、所用容器要大一些； 2、要保证酵母菌的活性；;2、配制物质的量浓度为0.05mol/L的CaCl2溶液;3、配制海藻酸钠溶液;操作： 称取0.7g海藻酸钠，放入50mL小烧杯中.加人10mL水，用酒精灯加热，边加热边搅拌，将海藻酸钠调成糊状，直至完全溶化，用蒸馏水定容至10mL。注意，加热时要用小火，或者间断加热，反复几次，直到海藻酸钠溶化为止; 加热使海藻酸钠溶化是操作中最重要的一环，涉及到实验的成败，一定要按照教材的提示进行操作。海藻酸钠的浓度涉及到固定化细胞的质量。如果海藻酸钠浓度过高，将很难形成凝胶珠；如果浓度过低，形成的凝胶珠所包埋的酵母细胞的数目少，影响实验效果。;4、海藻酸钠溶液与酵??细胞混合;5、固定化酵母细胞; 刚形成的凝胶珠应在CaCl2溶液中浸泡一段时间，以便形成稳定的结构。 检验凝胶珠的质量是否合格，可以使用下列方法： 一是用镊子夹起一个凝胶珠放在实验桌上用手挤压，如果凝胶珠不容易破裂，没有液体流出，就表明凝胶珠的制作成功。 二是在实验桌上用力摔打凝胶珠，如果凝胶珠很容易弹起，也能表明制备的凝胶珠是成功的。;这一阶段成功与否呢？怎样评价？;（二）用固定化细胞发酵;这一阶段成功与否呢？怎样评价？;类型;固定化细胞;练习:;2、下列叙述不正确的是（ ） A、从操作角度来考虑，固定化细胞比固定化酶容易 B、固定化细胞比固定化酶对酶的活性影响更小 C、固定化细胞固定的是一种酶 D、将微生物的发酵过程变成连续的酶反应应选择固定化细胞技术;