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高效液相色谱作为一种重要的分析方法，已广泛应用于废水水质的监测，它的特点是采用了高压输液泵、高灵敏度检测器和高效微粒固定相，很适于检测分析废水中高沸点不易挥发、分子量大、不同极性的有机污染物，例如各种化工生产废水中的酚类、苯胺类化合物；食品生产废水产生的邻苯二甲酸酯（塑化剂）；农业生产废水中的有机磷农药等。 在进行某类废水水质的高效液相分析前，需要进行充分的准备工作。一方面是针对废水水样的处理工作，一方面是对于仪器运行的准备工作。 首先，要注意对水样的前处理过程。目前最常用的就是固相萃取法，对于酚类废水、苯胺类废水、邻苯二甲酸酯类废水、农药废水等都可适用。前处理技术在有机污染物分析中有着十分重要的作用，前处理的好坏直接影响到色谱分析结果的准确性，所以要根据水质特点选择恰当的前处理技术。此外，液相色谱法常常用外标法进行定量分析，所以除了将水样进行前处理之外，还需准备好废水中需要检测的有机污染物的标准对照品溶液，用于绘制标准曲线。 其次，在进行废水水样液相色谱分析前，要根据待测有机物的种类选择好色谱柱，注意pH使用范围、流动相类型等。对于更换下来的色谱柱，一定要先用甲醇冲洗后再取下，并立刻用PEEK头密封两端保存，防止固定相干涸。安装柱子时，需注意流向指示，防止方向接反而损坏柱子，接口处不能留有空隙。 对于废水检测，常用到反相色谱柱，其中C18反相柱最为常用。对于酚类、苯胺类、邻苯二甲酸酯、有机磷农药类有机化合物的液相分析，甲醇—水和乙腈—水是最常见的流动相组合，此外含有一定比例的醋酸、磷酸的含盐流动相也常常使用。流动相应选用色谱纯度试剂，水需用18.2MΩ以上的超纯水，并尽量用流动相制备样品液；流动相一定要进行过滤，根据需要选择有机系和水系膜，常用的孔径为0.22μm和0.45μm；对抽滤后的流动相需进行超声脱气10-20min，以免在泵内产生气泡，影响流量的稳定性；水相流动相需经常更换（一般不超过2天），防止长菌变质。如果在测试过程中流动相所剩溶液的容积低于设定的最低限，会自动停泵，所以要及时加液，加液时注意不要让吸滤头高出液面，加液后必须排气泡，禁止气泡入泵。 当以上工作都准备妥当后，就可进行液相色谱分析仪的开机操作。打开电源，开启计算机，由下而上依次开启仪器各组件电源，主要有泵、检测器、柱温箱、控制器、自动进样器等。待各组件自检通过后，双击计算机桌面的色谱工作站图标，进入操作界面。 首先打开排气阀，进行泵的purge操作（排气），将管路里旧的流动相及大气泡排掉。正常情况下，仪器首先用95%甲醇（乙腈）—5%水比例流动相冲洗10-20min，然后再换为测试用流动相；如采用测试流动相为缓冲盐试剂，则要先用10%甲醇（乙腈）—90%水比例流动相冲洗20min以上后，再换上测试用流动相，不可直接换上缓冲盐流动相。一般情况下，流动相冲洗30min后，仪器方可稳定，最重要的是仪器基线走稳后，方可进样测试。正式进样分析前30min 左右开启D灯或W灯，以延长灯的使用寿命。泵流速一般不超过1mL/min。 进样分析前，要根据所检测有机物种类，确定洗脱方式并建立色谱分析方法，注意保存为自己命名的方法（Method），勿覆盖或删除他人的方法及实验结果。对于废水中酚类、苯胺类、邻苯二甲酸酯、有机磷农药等有机化合物的液相色谱分析，如已有可适用的国家正式颁布的高效液相分析法标准，则可按照标准所介绍的分析方法进行测试，如果还未有正式的标准，则需对于各个操作参数进行综合比较和优化，选取最适宜的分析方法进行水样的检测。操作参数主要包括流动相类型、混合比例、流速、检测信号波长或范围、LC分析时间、柱温等。 高效液相色谱分析是根据物质吸附作用的不同，将待测物质逐个洗脱、分离并检测的。在废水水质检测过程中，要根据废水水样中有机物的性质，选择好等度洗脱或梯度洗脱方式进行分析。 等度洗脱是在同一分析周期内流动相组成保持恒定，适合于组分数目较少，性质差别不大的样品。梯度洗脱是在一个分析周期内程序控制流动相的组成变化，如溶剂的极性、离子强度和pH值等，用于分析组分数目多、性质差异较大的复杂样品。对于废水有机污染物的检测，往往采用梯度洗脱，故要编辑梯度洗脱表，以此来缩短分析时间，提高分离度，改善峰形，提高检测灵敏度。梯度洗脱时，要注意溶剂的互溶性，不相混溶的溶剂不能用作梯度洗脱的流动相，当有机溶剂和缓冲液混合时，还可能析出盐的晶体，尤其使用磷酸盐时需特别小心；进行样品分析前必须进行空白梯度洗脱，以辨认溶剂杂质峰；用于梯度洗脱的溶剂需彻底脱气，以防止混合时产生气泡。在梯度洗脱时常出现压力的变化，因此要注意防止梯度洗脱过程中压力超过输液泵或色谱柱能承受的最大压力；每次梯度洗脱之后必须对色谱柱进行再生处理，需让10~30倍柱容积的初始流动相流经色谱柱，使固定相与初始流动相达到