siRNA干扰EMS1基因对MGC803细胞黏附的影响和机制研究.pdf

本研究课题资助项目 国家自然科学基金课题基金项目 （课题编号：No 万方数据 目 录 中英文缩略词表1 中文摘要2 英文摘要4 论文正文 1. 前言6 2. 材料和方法7 3. 结果16 4. 讨论31 5. 结论36 参考文献37 综述40 研究成果及发表论文53 致谢54 万方数据 主要英文缩略语索引 缩略词 英文全称 中文全称 BP biological process 生物学途径 MF molecular function 分子功能 GO Gene Ontology 基因本体 HUGO human gene nomenclature committee 人类基因命名委员会 KEGG Kyoto encyclopedia of genes and genomes 京都基因组百科全书 PMSF phenylmethylsulfony1 fluoride 苯甲基黄酰氟化物 PVDF polyvinylidene difluoride 聚偏二氟乙烯 1 万方数据 siRNA 干扰 EMS1 基因对 MGC803 细胞黏附的影响及机制 研究 硕士研究生：童细焱 导 师：谢海龙 中 文 摘 要 目的：本课题组前期利用基因芯片首次发现 EMS1 基因在胃癌中高表达， 并已证实 EMS1 是胃癌细胞增殖、侵袭和迁移的关键分子。本实验目的在于检测 siRNA 抑制 EMS1 表达对 MGC803 细胞黏附能力的影响，并探讨其具体分子机 制。 方法： 1. 通过 MGC803 细胞-HUVEC 黏附实验、细胞基质黏附实验检测抑制 EMS1 表 达后 MGC803 细胞的黏附能力。 2. 采用 4×44K 人全基因组寡核苷酸微阵列芯片技术比较分析正常 MGC803 细 胞与干扰 EMS1 表达后 MGC803 细胞基因表达的差异，筛选出 fold change=2 的基因为表达上调基因和 fold change=0.5 为表达下调基因。 3. 运用实时定量 PCR 和 Western Blotting 验证基因芯片结果。 4. 利用基因分析软件对筛选出的差异表达基因进行功能分析。 结果： 1. MGC803 细胞- HUVEC 黏附实验结果显示 MGC-8