筛选纤维分解菌及其对体外瘤胃发酵、奶牛生产性能的影响.pdfVIP

摘要 捅 要 本文旨在研究从奶牛瘤胃内容物中筛选一株对大豆秸秆有分解作用的细菌、对该细菌进 行镜检和PCR分子鉴定，并研究该菌株对体外瘤胃发酵、泌乳中期荷斯坦奶牛的泌乳量和乳 品质等生产性能的影响，试验分为3个试验完成。 试验一纤维分解菌的筛选、产酶条件的优化及菌株的鉴定。试验采用刚果红纤维筛选法， 从瘤胃内容物中筛选一株对大豆秸秆有分解作用的目标菌株。首先用4头装有永久性瘤瘘管 荷斯坦奶牛，以粉碎的大豆秸秆 包括豆秸、豆荚、少量的大豆 为粗饲料，共饲喂18d 预 饲期15d，正式期3d ，促进瘤胃里可分解大豆秸秆菌群生长。采用负压法取瘤胃内容物，过 滤后接入富集培养基中，使细菌繁殖扩增：其次，采用刚果红筛选法进行初筛，筛选出分解 纤维素的菌株，将初筛的菌株接入大豆秸秆培养基中复筛，最后根据复筛菌株纤维素酶活性 最终确定一株对大豆秸秆纤维素有分解作用的菌株。菌株产酶条件的优化试验，分析结果为： 株在刚果红培养基上，呈白色透明状，表面光滑。制片染色显微镜观察结果是该菌株为革兰 氏阴性无芽孢杆菌。对该菌株进行基因序列检测，采用PCR分子鉴定法，得到该菌株共有 菌株命名为SD菌 strawdisassembledbacterium 。 Soybean 试验二SD菌对奶牛体外瘤胃发酵的影响。试验采用体外模拟瘤胃环境培养法。试验根 和酸性洗涤纤维 ADF 。结果显示，试验组2瘤胃的各项指标的作用均比对照组好，说明 SD菌对体外瘤胃发酵有一定促进作用。 试验三SD菌对奶牛生产性能的影响。试验选用18头体重相近、体况良好、同一胎次、 产奶量相近地泌乳中期荷斯坦奶牛，将其随机分为3组，每组6头奶牛。根据日粮中添加不 10¨cfu／dL 和试验组2 同剂量的菌制剂共分为：对照组 0cfu／dL 、试验组l 0．75x 天、第20天、第40天的牛乳成分。结果显示，与对照组相比，饲喂SD菌40d后的产奶量 和乳脂率3．59％均显著提高 P 0．05 ，各组之间的乳糖率、非脂乳固体物差异不显著 JP O．05 。 综上所述，本试验筛选得到的SD菌对大豆秸秆的纤维素有分解作用，最适宜的产酶条 件是：37℃、培养60h、接种量l0％、氮源NH3N03添加量0．4％。并对其进行PCR分子鉴定 和镜检，将其命名为SD菌。这种细菌对体外瘤胃内环境稳态有一定的促进作用，可以提高 奶牛泌乳量和乳品质。 关键词大豆秸秆；纤维素分解菌：体外瘤胃发酵：生产性能 ABSTRACT Filter BacterialtheEffecton Cellulose--Degrading RumenFermentationandProduction Performancein Cows Dairy Abstract The ofthis wasfromHolsteinCOWSintherulnencontentto a objective study separate bacterialstrainwitha on detect straws，to thisbacterial higherdecompositionsoybean by andPCRmolecular．Andthestrainontherumen fermentationand microscopy study performance in COWS．Theincludedthree dairy study experiments． screenofcellulose 1，the Experiment decompositionbacteria。optimizeenzymeproduction conditionsandidentificationofthe uesd strawas to bacteria．Firstly，thestudy soybean roughage 4 feedholsteinCOWSwhichfittedwith rumenfistulalasted1 1 permanent 8d feedingperiod5d， formal straw smallamountof in phase3d ，soybeanincludinghaulm，pol，a soybean．To adopt rumencontent method．Thenitwas screened red bynegativepressure preliminarilyusingCongo thenselectedstraintO strawflask method，and fermentation screening degradesoybeanby shaking thebact