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蛋白质-蛋白质、蛋白质-核酸相互作用研究方法及在人肠道病毒A71型研究中的应用;;;;;;;;
酵母单杂交(Y1H)
染色质免疫沉淀(ChIP)
电泳迁移率实验(EMSA)
DNA-蛋白质印迹
Co-IP
;;; EMSA基本原理是蛋白质可以与末端标记的核酸探针结合,电泳时这种复合物比无蛋白结合的探针在凝胶中泳动的速度慢,即表现为相对滞后。该方法可用于检测DNA 结合蛋白、RNA结合蛋白,并可通过加入特异性的抗体来检测特定的蛋白质,并可进行未知蛋白的鉴定。该方法优点是可以进行定性和定量分析,缺点是不能鉴定低亲和力相互作用,对蛋白质复合体与核酸的结合也不能鉴定。;; EV-A71是引起婴幼儿手足口病的主要病原体之一。病毒不是独立生命体,必须通过与宿主相互作用才能完成增殖。通过以上综述我们发现,在EV-A71蛋白功能的研究中,主要用到了VOPBA、细胞内共定位、Y???H、Co-IP、报告基因、EMSA 和SPR 等技术。应用FRET 技术可以实现对EV-A71增殖的实时监测;应用PD技术可以实现在抗EV-A71多肽药物的筛选;VOPBA技术在RD和SK-N-SH 细胞表面受体与EV-A71的相互作用中得到了很好的应用;而在HSP90β蛋白对EV-A71进入细胞进行复制具有重要作用的研究中主要用了Co-IP和细胞内共定位等技术.;;
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