生化反应参数检测及控制42.ppt

3.1.2 化学参数检测;一、 pH测量 ;pH测量的意义;pH测量的意义;pH测量的意义;pH测量的意义;pH测量的意义;pH测量的意义;pH测量的意义;pH测量的意义;pH测量的意义;pH测量的意义;pH对菌体细胞的生长和代谢的的关系;pH测量的概念; pH是氢离子活度的负对数。 pH＝-lg α 式中 α——氢离子活度； pH——氢离子活度的负对数。 其中“p”只表明了在离子和变量之间有一种指数相关的数学关系。带一价正电荷的氢离子存在于全部含水或酸的液体中。在稀溶液中，氢离子活度近似等于其浓度。; 电极电位法测量pH是基于两个电极上所发生的电化学反应。用电极电位法测量溶液pH值，可以获得较准确结果。 ; 电极电位法的原理是用两个电极插在被测量溶液中（见上图），其中一电极为指示电极（如玻璃pH电极），它的输出电位随被测溶液中的氢离子活度变???而变化；另一电极为参比电极（例如氯化银电极），其电位是固定不变的。上述两个电极在溶液中构成了一个原电池，该电池所产生的电动势 E的大小与溶液的 pH值有关，电动势 E与pH的变化关系可用下式表示： ;式中 E ——测量电池产生的电动势； E*——测量电池的电动势常数（其与温度有关）； pH——溶液的 pH值； D——测量电极的响应级差（其与温度有关）。 因此，若已知E*和D，则只要准确地测量两个电极间的电动势，就可以测得溶液中的pH值了。 ; 如上所述，对溶液pH值的测量，实际上是由发送器所得毫伏信号经由测量仪表放大指示其pH值。该发送器所得的毫伏信号实际上就是由指示（ pH）电极、参比电极和被测溶液所组成的原电池的电动势。 ; 对参比电极的基本要求是它的电位尽可能地恒定不变。 在实际测量过程中，经验表明，大多数测量中的问题来自参比电极系统，因此，有必要认真研究一下参比电极的性质。; 一个理想的参比电极要满足下列这些要求： （1）电位稳定； （2）没有极化性； （3）在重负荷下指示电位可逆变化； （4）电位响应只遵守能斯特方程； （5）没有温度滞后现象； （6）温度系数低。 最常用的参比电极有甘汞电极和氧化银电极。 ;甘汞电极; 电极的外壳是一个玻璃管，里面套有一根小玻璃管，它的顶部伸出电极引线（或接线柱），引线的下端浸没在汞中。汞的下面有糊状甘汞（Hg2Cl2），汞和甘汞用棉花堵住，只有离子才能通过，而汞和甘汞不会漏失。小管与大管之间充以氯化钾（KCl）溶液，末端用多孔陶瓷堵塞（称为隔膜或盐桥）。甘汞电极插入溶液中时，电极内的少量氯化钾溶液通过多孔陶瓷渗入到被测溶液中，实现电极引线和溶液间的电的连通。 ; 甘汞电极电位只与氯化钾溶液的浓度有关，不随被测溶液的酸碱度而变化。所以只要氯化钾的浓度保持不变，甘汞电极的电位在一定的温度条件下是一个常数。例如 25℃时充有1mol／LKCI溶液的甘汞电极的电位为+ 0.2802 V，充有饱和氯化钾溶液的甘汞电极的电位为+0.2415 V。 然而，当温度变化时，甘汞电极的电位随之而变，充有饱和氯化钾溶液的甘汞电极的温度系数为-0.76 mV／℃，充有0.lmol/LKCI溶液的甘汞电极的温度系数为- 0.07 mV／℃，虽然饱和甘汞电极的电位易受温度变化的影响，但因配制饱和氯化钾溶液比较方便，所以饱和甘汞电极还是最为常用的。 ; 甘汞电极不宜在强酸或强碱性的溶液中使用，因为此时的液体接界电位较大，给测量带来较大误差。在发酵液中由于大分子的带电粒子（如蛋白质）或其他相的存在而成乳浊液时，都要使液接界电位升高，有时可达30—50 mV，造成发酵液培养过程中 pH测量值的较大偏离。 ; 氯化银电极的结构和原理都和甘汞电极相似（见图）。在一根铂丝上镀上纯银（或银丝），然后使其表面复盖一层氯化银膜，并将它浸没在盛有氯化钾溶液的下端具有隔膜结构的玻璃管内。 ; 同样其电极电位由参比电解质溶液中氯化钾的浓度所决定，与被测离子浓度无关。 该电极的优点是在较高温度时，电极电位比较稳定，一般可以用于250 ℃以下。; 对指示电极的基本要求是其电极电位值随被测溶液氢离子活度的变化而变化。原则上讲，任何与氢离子可逆反应的电极都可以用来测定溶液中的pH值。如铂／氢电极、金属电极等。 ;玻璃pH电极;玻璃pH电极;玻璃pH电极;复合pH电极; 因为复合电极远比分开的电极测量容易，因此，所用的电极形式都是复合电极。在复合电极中，玻璃电极是由参考电极包裹着 。这种结构不但便于安装与使用，而且外参比液也起屏蔽作用，以防电气干扰作用于指示电极。 ;式中 S——电极斜