第五章 固相析出分离法.ppt

第五章 固相析出分离法;目的： 浓缩； 初步纯化 ； 将已纯化的产品由液态变成固态，加以保存或进一步处理。 固相析出法是最古老的分离和纯化生物物质的方法，但目前仍广泛应用在工业上和实验室中。; 固相析出操作常在发酵液经过过滤和离心（除去不溶性杂质及细胞碎片）以后进行，得到的沉析物可直接干燥制得成品或经进一步提纯，如透析、超滤、层析或结晶制得高纯度生化产品。; 盐析法 有机溶剂沉淀法 固相析出法 等电点沉淀法 结晶法 其它多种沉淀法;第一节 盐析法 第二节 有机溶剂沉淀法 第三节 其它沉淀方法 第四节 结晶;第一节 盐析法;定义：盐析法是利用各种生物分子在浓盐溶液中溶解度的差异，通过向溶液中引入一定数量的中性盐，使目的物或杂蛋白以沉淀析出，达到纯化目??的方法。 优点：简单、经济、较少变性 缺点：分辨率不高；沉淀含大量盐析剂，要除盐；产生氨的恶臭;两种现象： 盐溶：低盐情况，盐离子强度的增高，蛋白质溶解度增大 盐析：高盐，盐离子强度增加，蛋白质溶解度减小;*;*;一、基本原理;盐析作用（salting out）原理;logS=?-Ks? S——蛋白质溶解度，g/L； ?—盐离子强度,