以Bcl2修饰同种异体骨髓间充质干细胞移植对兔心梗后心功能不全影响.pdf

经???修饰的同种异体骨髓问充质千细胞移植对兔心梗后心功能不全的影响摘要目的：心肌梗死?／，?????能力。对干细胞加以基因修饰，使干细胞具有更好的促血管再生、抗细胞方法：制备含目的基因???的原始质粒。将目的基因???从原始毒质粒。大量制备重组质粒，共转染??赴??占?《??代病毒??中文摘要??????匀死嘟】倒钩裳现赝?胁。?后心室重构的发生严重影响了?患者的生活质量。?后心功能不全已成为患者死亡的主要原因。目前尽管?的死亡率下降，但?后心功能不全仍未改善，已成为家庭及社会沉重的负担。心功能不全是各种心脏疾病的终末阶段。药物治疗可以缓解病情，但是无法使受损的心肌细胞再生。要使心肌细胞再生乃至衰竭的心脏恢复功能仍是一项巨大的挑战。干细胞治疗对于逆转终末期损伤心脏是最有希望的治疗方法。间充质干细胞????????????存在于多种成体组织内，骨髓是??的主要来源。骨髓间充质干细胞?????????可参与受损心肌的重建，可以提高左室射血分数，降低左心室收缩末期和舒张末期容积、减少梗死面积并改善左室重构。由于?后微环境的改变使???诠Ｋ佬募≈胁荒艹て诖婊畲佣?拗屏烁上赴?男?复能力。人们试图通过基因工程的方法来解决这一问题。基因工程是将外源性基因导入目的细胞中，使得该细胞具备过表达或静默表达某种基因的凋亡、抗炎、修复心功能的作用。外源性基因导入目的细胞中有病毒载体系统和非病毒载体系统。非病毒载体的转导效率低。目的基因只能实现瞬间表达，容易引发免疫反应和被机体所清除。本实验采用腺病毒转染????H拘?矢撸?薅靖弊饔谩??．?蔷哂忻飨砸种频蛲鲎饔玫幕?因，以???修饰???勺魑L岣咭浦蚕赴?婊盥实氖侄巍１狙芯磕?的在于观察经???修饰的同种异体???浦捕酝眯墓：笮墓δ懿蝗?模型心功能的影响。质粒上切下连接到????—??瓻??刈榇┧笤靥濉＝?橹ふ?返?????．??瓻??瓸?一?R频絧???靥迳希?玫絧?????????????????? 琹????????⒂檬凳庇ü舛?縋?检结果：?中文摘要以?代腺病毒感染??赴??????锤蠢┰鍪占?《荆?罰???病毒的大量扩增。经反复冻融后保存，于．?。?４娲?谩２杉?月龄兔胫骨骨髓，用密度梯度离心法和贴壁法培养骨髓间充质干细胞至第九代。用带绿色荧光蛋白标记的空载体腺病毒及带有???基因的腺病毒分别转染上述培养细胞。结扎冠状动脉前降支制作心功能不全模型。两周后根据超声心动图结果选取造模成功模型，即左室射血分数???琹?????????????ィ?⑺婊?治狝小???瓸?．????、???????和??组???？P亟?邢赴?浦玻珹?狤??狟?．?组移植?．????．??????狤??橐浦睞?瓻????????组注入等量??。?芎笮行脑喑??觳椋?饬縇??⒆笫?缩短率??琹????????⒆笫沂嬲拍┠诰????，???????⒆笫沂账跄┠诰?测梗死边缘区心肌组织???的表达。分析心功能与???的表达的相关性。?染色观察心肌病理改变，荧光显微镜下观察标记的骨髓间充质干细胞的生存。????籊?腺病毒滴度为??×????痬??采用密度梯度离心法和贴壁法成功培养出?????潦???赴?刺?院芎茫?本实验采用第九代????罴袽?为???腥??后观察到??表达，腺病毒转染率??ィ?成功制备兔心梗后心功能不全模型，造模后存活?只，?芎蟾?菪脑嗖食?峁?霸炷３晒ε卸ū曜???弋???，共有??辉炷３晒Α?????狟?．?楹虯???组与??组相比，心功能改善均优于??组，??????一?楦纳聘?飨浴?????．???．??％，??????．??％，?????????ィ琍?．??，??值????±????????????±???????．????????琍?．??，??礫?．???．???，?．?????????????±??????琍?．??，?值??．???．??％，????±????ィ??．???．??％，??????心肌梗死边缘区???表达在????狟??组明显提高?．???．????±???，??????钜炀?型臣蒲б庖澹??与???表达呈正相关，相关系数??．???龆ㄏ凳齊??．???毓榉匠碳八?邢凳????????????????????，???±???，??????甧? 结论：间充质干细胞易于分离并且大量培养，易于被外源基因转染并率高，无毒副作用。经???修饰的同种异体骨髓间充质干细胞移植可更关键词：兔；基因；???转染：凋亡；间充质干细胞；心肌梗死；心均有统计学意义，回归方程为??．???．??；?浦蚕赴?婊盥侍?高了，在荧光显微镜下????狟?一?锽??数目是????榈???倍：??．??．???组和????橛隓??橄啾龋?±砀谋浣?轻，????瓸?．?樾Ч??谩?稳定表达，同种间无免疫原性。本实验