- 118
- 0
- 约4.53千字
- 约 7页
- 2016-08-01 发布于河南
- 举报
RNA提取标准流程
RNA提取标准流程
原理:TRIzol试剂适用于从细胞和组织中快速分离RNA。TRIzol使样品细胞裂解,溶解细胞内含物,同时因含有RNase抑制剂可保持RNA的完整性。在加入氯仿离心后,溶液分为水相和有机相,RNA在水相中,取出水相用异丙醇沉淀可回收RNA。
预防RNase污染注意事项:1. 经常更换新手套,皮肤上常带有的细菌,霉菌可能成为RNase的来源。2. 使用灭过菌的RNA专用塑料制品避免交叉污染。3. RNA提取过程中应使用不含RNase的塑料和玻璃器皿。玻璃器皿塑料制品高压灭菌。4. 配制溶液应使用无RNase的水(将水加入处理过不含RNase的玻璃瓶中,加入DEPC至终浓度0.0% v/v,oC放置过夜,高压灭菌。注:DEPC有致癌之嫌,需小心操作。)RNA的提取准备试剂:氯仿,异丙醇oC,用时取出置于冰上),75%乙醇,无RNase的水溶液均需用0.0% DEPC处理过的水配制10×Loading buffer(宝生物工程(大连)有限公司,货号:D603,35元,1mL×5支)
准备器材:1 mL、200 μL枪头、小烧杯*3、1.5 mL管、2 mL管若干、报纸、卷纸、研钵,以上物品全部需要高压。
操作步骤:1. 研磨+匀浆将组织在液氮中磨碎(不均一的样品,如、肾上腺等腺体,必须研磨),50~100 mg组织样品(肝脏可减少样品量到30
您可能关注的文档
最近下载
- 基于单片机的自动浇花系统的设计.docx VIP
- 2019版 人教版 高中体育与健康 必修 全一册《第九章 田径类运动》大单元整体教学设计[2020课标].pdf
- 2024年文创行业报告-Mob研究院识具出品.doc VIP
- 飞机轴承端盖冲压模具设计.doc VIP
- 余华《活着》ppt可编辑.pptx VIP
- 新编日语教程4-课件-第4课.ppt VIP
- 中国太平洋财产保险股份有限公司(北京地区)住宅工程质量潜在缺陷保险.pdf VIP
- 2025AHA心肺复苏指南解读.pptx
- 2025年广西中考语文作文指导:“走,到田野去!” .docx VIP
- Unit+4+Eat+Well+Section+A+1a-1d+课件+2024-2025学年人教版(2024)七年级英语下册++.pptx VIP
原创力文档

文档评论(0)