蛋白质化学中的层析技术综述.ppt

第四章 蛋白质化学中的层析技术 层析法也称色谱法(chromatography)，是1906年俄国植物学家Michael Tswett发现并命名的。他将植物叶子的色素通过装填有吸附剂的柱子，各种色素以不同的速率流动后形成不同的色带而被分开，由此得名为“色谱法”。 1941年，英国生物学家Martin和Synge首先提出了色谱塔板理论，为后来各种色谱技术的发展奠定了基础。 第一节 层析概述 第二节 离子交换层析 第三节 亲和层析 第四节 凝胶过滤 第五节 疏水层析 第六节 分配层析 第七节 吸附层析 第一节 层析概述 一、层析的原理 层析技术是一组相关分离方法的总称，当待分离的混合物随流动相通过固定相时，由于各组份的理化性质存在差异，与两相发生相互作用（吸附、溶解、结合等）的能力不同，在两相中的分配（含量对比）不同，而且随流动相向前移动，各组份不断地在两相中进行再分配，从而达到将各组份分离的目的。 二、层析的分类 按固定相基质的形式： 柱层析、纸层析和薄层层析 根据流动相的形式： 液相层析、气相层析 三、层析前蛋白质处理 主要是利用盐析法、等电点沉淀、有机溶剂沉淀等方法，使目的蛋白与其它较大量的杂蛋白分开，这些方法的特点