细胞生物学实验2.pptVIP

实验二 DNA的Feulgen染色法 PAS反应显示细胞内多糖 实验目的 1.学习DNA的Feulgen染色方法，观察染色结果，了解反应原理。 2.学习细胞内多糖染色显示的方法，观察染色结果，了解反应原理。 实验原埋 　　DNA经弱酸（1 mol/l HCl）水解，其上的嘌呤碱基和脱氧核糖之间的键打开，使脱氧核糖的一端形成游离的醛基，这些醛基在原位与Schiff试剂（无色品红亚硫酸溶液）反应，形成紫红色的化合物，使细胞内含有DNA的部位呈紫红色阳性反应。紫红色的产生，是由于反应产物的分子内含有醌基，醌基是一个生色基团，所以具有颜色。对照组预先用热的三氯醋酸或DNA酶处理，抽提出细胞中的DNA而得到阴性反应，从而证明了Feulgen反应的专一性。 　　过碘酸能氧化细胞内多糖的1,2－乙二醇基，使醛基释放。暴露的自由醛基与Schiff试剂反应呈紫红色。 实验用品 ⒈器材：显微镜、恒温箱、剪刀、镊子、载玻片、盖玻片、吸水纸。 ⒉材料：Carnoy液固定的大蒜根尖（1～1.5 cm），马铃薯徒手切片。 ⒊试剂：Carnoy固定液、1 mol/l HCl、Schiff试剂、亚硫酸水溶液（漂白液）、5％三氯醋酸；过碘酸酒精溶液、 Schiff试剂－酒精溶液、唾液。 0. 5％固绿酒精溶液（95％酒精溶解）。 实验方法 　DNA的Feulgen染