第20章高效液相色谱法.pptVIP

第20章 高效液相色谱法(HPLC) 20.1 概述 高效液相色谱法：以气相色谱为基础，在经典液 相色谱实验和技术基础上建立的一种液相色谱法 20.2 基本理论和条件选择 一、塔板理论 二、速率理论 三、HPLC法中分离条件的选择 一、塔板理论 二、速率理论（与GC对比） 图示 back 固定相与装柱方法的选择： 选粒径小的、分布 均匀的球形固定相（dp≤10μm）首选化学键合相， 匀浆法装柱 2. 流动相及其流速的选择： 选粘度小、低流速的流动相——甲醇，1ml/min 3. 柱温的选择： 选室温250C左右 20.3 各类高效液相色谱法 一、液固吸附色谱法（LSC） 二、液液分配色谱法（LLC） 三、化学键合相色谱法（BPC） 三、化学键合相色谱法（BPC） （一）化学键合相 （二）反相键合相色谱 （三）正相键合相色谱 （四）离子对色谱和离子抑制色谱 （一）化学键合相 P526 利用化学反应将固定液的官能团键合在硅胶 载体表面 特点： 1）不易流失 2）热稳定性好 3）化学性能好 4）载样量大 5）适于梯度洗脱 （二）反相键合相色谱 流动相极性 固定相极性 1．固定相：非极性的烷基键合相 C8柱，C18柱（ODS柱——HPLC约80%） 非极性的烷基C数