TM-119气相色谱法.docVIP

气相色谱法 起草人 审核人 审核人 批准人 部门 QC QA QC 质量管理部 姓名 饶涛 黄祥彪 汪大才 邓志军 签名 日期 分发部门： 质量管理部QC 目的 制订气相色谱法标准操作规程，规范气相色谱法的操作。。 范围 气相色谱法的检验。 职责 QC 操作内容 4.1 4.1.1 工作原理 气相色谱法系采用气体为流动相（载气）流经装用填充剂的色谱柱进行分离测定的色谱方法。物质或其衍生物气化后，被载气带入色谱柱进行分离，各组分先后进入检测器，用记录仪、积分仪或数据处理系统记录色谱信号。 4.1.2 气相色谱仪由载气源、进样部分、色谱柱、柱温箱、检测器和数据处理系统组成。 4.1.3 载气源 载气有氮，氦，氢，常用氦或氮作载气。可由高压钢瓶或高纯度气体发生器提供，经过适当的减压装置，以一定的流速经过进样器和色谱柱。实际工作中要在气源与仪器之间连接气体净化装置。 4.1.4 进样部分 进样方法一般采用溶液直接进样或顶空进样。 溶液直接进样采用微量注射器、微量进样阀或有分流装置的气化室进样；采用溶液直接进样时，进样口温度应高于柱温30～50℃；进样量一般不超过数微升；柱径越细，进样量应越少，采用毛细管柱时，一般应分流以免过载。 顶空进样适用于固体和液体供试品中挥发性组分的分离和测定。将固态或液态的供试品制成供试液后，置于密闭小瓶中，在恒温控制的加热室中加热至供试品中挥发性组分在非气态和气态达至平衡后，由进样器自动吸取一定体积的顶空气注入色谱柱中。 4.1.5 色谱柱 色谱柱为填充柱或毛细管柱。填充柱的材质为不锈钢或玻璃。毛细管柱的材质为玻璃或石英。新填充柱和毛细管柱在使用前需老化以除去残留溶剂及低分子量的聚合物，色谱柱如长期未用，使用前应老化处理，使基线稳定。 填充柱的老化一般处理方法是将柱装入色谱仪中使载气缓缓通过色谱柱，然后在高于正常温度20～50℃、而不超过固定液最高使用温度时加热24小时。为了避免柱污染检测器，在老化过程中不要将柱出口与检测器相接，让其放空，如有条件，可以用程序升温方法老化柱，效果更好（以每分钟2～5℃的速率把温度升高到老化温度保持12～24小时）。 毛细管柱的老化方法是在比最高分析温度高20℃或最高柱温（温度更低者）的条件下老化柱子2小时，如果在高温10分钟后背景不下降，立即将柱子降温并检查柱子是否有泄漏。 4.1.6 柱温箱 由于柱温箱温度的波动会影响色谱分析结果的重现性，因此柱温箱控温精度应在±1℃，且温度波动小于每小时0.1℃。温度控制系统分为恒温和程度升温两种。 4.1.7 检测器 适用气相色谱的检测器有 火焰离子化检测器（FID）；热导检测器（TCD）；电子捕获检测器（ECD）；火焰光度检测器（FPD）；氮磷检测器（NPD）；质谱检测器（MS）等。在药物分析中火焰离子化检测器是最常用的检测器。 4.1.8 数据处理系统 可分为记录仪、积分仪和计算机工作站等。 4.2 测定方法 4.2.1 检查仪器上的电源开关，均应处于“关”的位置。 4.2.2 选好合适的色谱柱，柱的两端应堵有盲堵。 4.2.3 取下盲堵，分清入口端及出口端，套好石墨密封圈及固定螺母，小心装于仪器上，拧紧固定螺母，但也勿过紧，以不漏气为合适。换下的色谱柱，应堵上盲堵保存。 4.2.4 开启载气钢瓶上总阀调节减压阀至规定压力。 4.2.5 用检漏液（表面活性剂溶液）检查柱连接处是否漏气，如有漏气应检查柱两端的石墨密封圈或再略加紧固定螺母。 4.2.6 打开各部分电路开关，打开色谱工作站，设定进样口（汽化室）、柱温箱、检测器温度和载气流量等色谱参数。开始加热。 4.2.7 待各部分设定参数恒定后，开启氢钢瓶总阀、空气钢瓶总阀，同载气操作。 4.2.8 按下点火按钮（对于FID检测器来说）（有些仪器在检测器温度达到一定温度后有自动点火功能），应有“扑”的点火声，用玻璃片置FID检测器气体出口处，检视玻璃片上应有水雾，表示已点着火，同时显示屏上应有响应信号。注意：对于带有自动点火功能的仪器来说，有时工作站已显示点火成功，但是实际没有点火，所以每次试验都应该用玻璃片进行检视，以确保点火成功。 4.2.9 调节仪器的放大器灵敏度等，走基线，待基线稳定度达到可以接受的范围内，即可进样分析。 4.2.9.1 选用合适的注射器 气相色谱仪分析最常用的是10μl微量注射器，其进样量一般不要少于1μl。如果进样量要控制在 1μl以下，就应采用5μl 或1μl的注射器。此时要注意：5μl或1μl的注射器往往是将样品抽在针尖内，因此观察不到针管中的液面，故很可能抽入气泡。取样时应反复推拉针芯，以确保针尖内没有气泡。 4.2.9