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Chapter5-2Golgicomplex高尔基复合体杨潍潍细胞生物学教研室yangww@wfmc.edu.cn1CamilloGolgi(1843-1926),NobelPrize19062嗜银的网状结构内网器(internalreticularapparatus)为纪念发现者,命名为高尔基体(Golgibody)1898年,GolgiC所描述的“内网器”形态3高尔基复合体(Golgicomplex)高尔基复合体(Golgicomplex)4高尔基复合体形态结构数量与分布极性及基鉴别化学组成功能异常与医学的关系5一、高尔基复合体的形态结构普通显微镜下,大多数细胞的高尔基复合体呈网状。电镜下有三种基本结构:小囊泡、扁平囊和大囊泡。每种成分都由一层单位膜围成膜性囊泡,协同完成细胞的分泌功能。6高尔基复合体(confocal)7高尔基复合体(TEM)8扁平囊主体,呈盘状,3-8层扁平囊堆扁平囊间距:20-30nm;囊腔宽:15-20nm凸面:形成(顺)面;凹面:成熟(反)面凸面:形成(顺)面;形成面膜厚:6nm;成熟面膜厚:8nm小囊泡生成面附近,40-80nm球形小泡,膜厚:6nm;囊腔内含:中等电子密度的物质泡内含物质:低电子密度物质,较透明。来源:小囊泡融合。来源:由rER‘芽生’而来。大囊泡分泌面附近,100-500nm;膜厚:8nm;泡内含物质:高电子密度物质,浓缩泡。来源:扁平囊周边或局部球状膨突脱落凹面:成熟(反)面9二、高尔基复合体的数量与分布高尔基体在真核细胞中普遍存在,在不同的细胞中分布位置不同。胰腺细胞、甲状腺细胞、肠上皮细胞,高尔基复合体分布在细胞核周围。肝细胞高尔基复合体分布在细胞边缘。大多数无脊椎动物细胞和植物细胞中的高尔基复合体呈分散状。在不同的细胞、细胞不同的时期数量不同,一般分泌性强的细胞及分化好的细胞数量较多。10三、高尔基复合体的极性及其鉴别高尔基复合体是一种具有极性的细胞器根据细胞化学特性可以划分四个不同的功能区域,含有不同的酶系,执行不同的功能,又严格按照程序进行。1112高尔基体的精细结构trans-tubularnetworktranssacculescissacculescis-tubularnetwork13顺面管网具有蛋白质分选站的作用顺面管网是高尔基体生成面的第一层结构,嗜锇反应阳性。顺面管网接受来自RER新合成的物质并将其分类,大部分转入中间膜囊,小部分蛋白质再运回RER。运回RER的蛋白质在C-端都具有一个特殊的四肽序列KDEL/HDEL。RER腔中的驻留蛋白都具有这四肽序列。RER内的蛋白质(含有KDEL)中间膜囊顺面膜囊COPI包被囊泡COPII包被囊泡KDEL受体(KKXX)RER1415顺、反面膜囊顺面膜囊是由靠近顺面管网结构的2-3层扁平囊构成,标志酶是烟酰胺腺嘌呤二核苷磷酸酶(NADP酶)。反面膜囊是由位于顺面膜囊下的2-4层扁平囊构成,标志酶是焦磷酸硫胺素酶(TPP酶)。顺反面膜囊共同完成高尔基体中糖蛋白修饰、糖脂形成、多糖合成等主要功能。16反面管网主要功能是蛋白质的分类与包装反面管网是扁平囊反面最后1-2层,标志酶是胞嘧啶单核苷酸酶(CMP酶)。由小泡和分枝的小管组成的网状结构。反面管网在蛋白质与脂类的转运过程中起到了分选、包装和运输的作用。四、高尔基复合体的化学组成17脂类成分脂类成分的含量介于内质网和质膜之间。脂类成分的种类与内质网和质膜相同。酶成分磺基-糖基转移酶:催化糖脂合成。糖基转移酶:催化糖蛋白合成。酰基转移酶:催化磷脂合成。糖苷酶:去除糖分子。其他酶:氧化还原酶、磷酸酶、激酶、磷酯酶。标志酶18五、高尔基复合体的功能蛋白质的糖基化作用N-连接糖蛋白的糖基化O-连接糖蛋白的糖基化蛋白质的水解作用蛋白质的分选与运输溶酶体酶蛋白分选、运输和溶酶体形成分泌性蛋白质的分选与运输191、蛋白质的糖基化作用糖基与蛋白质的连接方式:N连接的糖蛋白:是蛋白质分子中Asn氨基与寡糖链共价相连。这种糖基化过程开始于内质网腔,完成于高尔基体。O连接的糖蛋白:是蛋白质分子中Ser和Thr羟基与寡糖链共价相连。其糖基化过程全部或主要在高尔基体内完成。20N-连接糖蛋白的糖基化N连接寡糖链前体的组成成分:2个N-乙酰葡萄糖胺(GlcNAc)、9个甘露糖(Man)和3个葡萄糖(Glc)。N连接糖蛋白寡糖前体在ER腔侧从多萜醇向多肽链的转移过程AsnAsnER膜ER腔侧细胞质侧21内质网葡萄糖苷酶III寡糖转移后,寡糖链中的3个Glc。2223高尔基体中高甘露糖糖蛋白的形成甘露糖苷酶I甘甘N-乙酰葡萄糖胺转移酶甘甘N-乙酰葡萄糖胺甘露糖苷酶II甘甘N-乙酰葡萄糖胺转移酶N-乙酰葡萄糖胺半乳糖转移酶唾液酸转移酶复合寡糖糖蛋白的形成2425高尔基体中的糖基化修饰有严格的顺序性
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