细胞膜的渗透性幻灯片.pptVIP

实验三、细胞膜的渗透性 一 、实验目的 了解细胞膜的渗透性及各种物质进入细胞的速度。 二、实验原理 与人工脂双层膜不同的是，生物膜不但允许水和非极性分子借简单的物理扩散作用透过，还允许各种极性分子，如离子、糖、氨基酸、核苷酸及很多细胞代谢产物通过特有的机制通过。 血红蛋白从红细胞中逸出的现象称为溶血现象。 将红细胞放置在各种溶液中 ，渗入红细胞的溶质能提高红细胞渗透压，使水进入红细胞，引起溶血及细胞膜破裂。 由于溶质透入速度不同，溶血时间也不同。因此，可通过溶血现象来测量各种物质通透性的差别。 三、材料、试剂和仪器　　1．材料 一龄鸡，将鸡血溶于含有抗凝剂的等渗液中（肝素钠0.2mg/mL,一般范围在 0.01-0.2mg/mL；等渗液为0.15mol/L NaCl）　　2. 试剂 0.17 mol／L氯化钠，0.17 mol／L 氯化铵，0.17 mol／L硝酸钠， 0.32 mol／L葡萄糖，0.32 mol／L甘油，0.32 mol／L乙醇，0.32mol／L丙醇；0.12 mol／L硫酸 钠，0.10 mol／L草酸钠，0.10mol／L醋酸钠，　　3. 器材 试管，5mL量筒，滴管，载玻片，盖玻片，光学显微镜。 血液的主要成分 （一）血浆 血浆相当于结缔组织的细胞间质，为浅黄色液体，其中除含有大量水分以外，还有无机盐、纤维蛋白原、白蛋白、球蛋白、酶、激素、各种营养物质、代谢产物等。 （二）血细胞 血细胞分为三类：红细胞、白细胞、血小板。 1、红细胞 呈双面凹陷的圆盘状，直径约为7.5微米，没有细胞核，细胞质内没有细胞器而有大量血红蛋白。血液的颜色就是由血红蛋白决定的。血红蛋白具有与氧和二氧化碳结合的能力。 2、白细胞 在血液中呈球形，能以变形运动穿过毛细血管壁进入周围组织中。 根据细胞质中是否含有特殊颗粒，可把白细胞分为粒细胞和无粒细胞。 无粒细胞分为两种，淋巴细胞和单核细胞。 粒细胞分为中性粒细胞、嗜酸粒细胞、嗜碱粒细胞。 3、血小板 也称血栓细胞，在流动的血液中呈双面凸的圆盘状，侧面看呈梭形，直径2-4微米。血小板的功能是参与止血与凝血。 两个概念 红细胞压积：又称血细胞比容，指的是血细胞在血液中所占的容积百分比，又称为红细胞压积。正常成年男性为40%～50%，女性37%～48%.它反映了血液中红细胞和血浆的相对数量变化。 血清：血液经自然凝固1～2小时，血凝块回缩，析出淡黄色透明液体即血清。 抗凝血剂的种类与特点 常用抗凝血剂包括： 1.非肠道用药抗凝血剂：如肝素； 2.香豆素抗凝血剂类：常用的有双香豆素 、华法令和新抗凝等，通过拮抗维生素K使肝脏合成凝血酶原及因子Ⅶ、Ⅸ和Ⅹ减少而抗凝； 3.抗血小板凝集药物：如阿司匹林，对血小板环氧化酶有抑制作用； 4.蛇毒溶栓剂：如去纤酶、抗栓酶和清栓酶，可溶解已形成的血栓使血管再通，从而起到抗凝血作用。 肝素的作用机理 肝素在体内、体外均有强大抗凝作用。 与其带大量负电荷有关，可使多种凝血因子灭活。这一作用依赖于抗凝血酶III（antithrombin? III，AT? III ）。 At? III是凝血酶及因子Ⅻα、Ⅺα、Ⅸα、Ⅹα等含丝氨酸的蛋白酶的抑制剂。它与凝血酶通过精氨酸-丝氨酸肽键相结合，形成At? III凝血酶复合物而使酶灭活，肝素可加速这一反应达千倍以上。 四、实验程序 1．血红细胞悬液： 用注射器吸入 2mL含有肝素的等渗液后从鸡翼下静脉取鸡血5mL，加 入50mL烧杯，将鸡血用等渗液进行1：10稀释。 2． 溶血现象观察： 取试管一支加入3mL蒸馏水， 加入1滴或2滴稀释的鸡血，轻混一下，然后静止注意观察溶液的颜色变化。由于红细胞发生破裂，溶液颜色由浑浊的红色逐渐清亮。此即为溶血现象。 3、溶血前后的镜检观察 在溶血前、后分别取一滴血细胞，滴于载玻片上，并盖上盖玻片，光镜下观察血细胞的形态差异。 4． 鸡红细胞的渗透性记时比较 （1）分别取3只试管，各加入3ml的 0.17 mol／L氯化钠，0.17 mol／L 氯化铵，0.17 mol／L硝酸钠， 加入2-3滴血红细胞悬液，观察反应现象。 （2）分别取4只试管，各加入3ml的 0.32 mol／L葡萄糖，0.32 mol／L甘油，0.32 mol／L乙醇，0.32mol／L丙醇；加入2-3滴血红细胞悬液，观察反应现象。 4． 鸡红细胞的渗透性记时比较 （3）分别取3只试管，各加入3ml的 0.12 mol／L硫酸 钠，0.10 mol／L草酸钠，0.10mol／L醋酸钠，加入2-3滴血红细胞悬液，观察反应现象。 （4）在反应前、后分别取1-2滴血细胞，滴于载玻片上，并盖上盖玻片，光镜下观察血细胞的形态差异。 五、结果与分析 将观察到的现象记录， 并