第4讲+细胞融合与体细胞杂交要点.ppt

第4讲 细胞融合与体细胞杂交 1 新品种培育技术 2 杂交 3 1.通过不同的基因型的个体之间的交配而取得某些双亲基因重新组合的个体的方法。 2.两条单链DNA或RNA的碱基配对。 杂交优势：两个遗传基础不同的植物或动物进行杂交，其杂 交后代所表现出的各种性状均优于杂交双亲，比如抗逆性强 、早熟高产、品质优良等。 一般情况下，通过生殖细胞相互融合而达到这一目的过程称 为杂交。较多的是种间、种内杂交。 由体细胞相互融合达到这一结果的过程称为体细胞杂交。 4 部分野生品种的块茎、果实虽不能食用，但它们的植株具有较强的抗病虫害、抗盐碱性和耐寒能力。因此，用野生马铃薯和番茄分别与马铃薯、番茄作物杂交，培育出了生存能力较强的杂交系植物。 杂交玉米等杂交植物比它们的亲本 更为健壮，产量更高。 杂交拟南芥（中间）比其亲 本（左和右）要大 《自然》（Nature）2008年11月23 日：中美科学家近日研究发现杂交 植物比其亲本生长更大更好的原因 :负责光合作用和淀粉代谢的基因 在白天要更为活跃 5 不亲和性 不亲和性：在有性生殖过程中，由于生物个体的细胞或组织水平上的不协调而使受精或接合不能正常进行，或是受精后不能产生后代的现象。例如：生殖细胞不能融合，或受精卵不能发育，或子代无繁殖能力等。 是双亲个体间基因型的不协调或是染色体组非同源性在生殖生理表型上的一种反映。不亲和性是稳定物种的重要机理之一。 种间不亲和性：异种、异属生物个体之间的生殖不亲和现象常由染色体组的不同所造成。一般地说，越是远缘则不亲和性越高，直到完全不能受精。 种内不亲和性：种内个体间的不亲和现象往往是受不亲和基因所制约而并不是染色体组不同的结果。 6 远源杂交 远缘杂交：不同种属之间，或是地理上远缘的种内亚种之间个体的交配称为远缘杂交。 由于种属间存在着种种隔离机制，致使远缘杂交常表现不亲和或获得的远缘杂种表现不育。 体细胞杂交是解决远源杂交不亲和性的有力手段之一，更好地利用自然界基因资源，培育新物种 7 8 视频： /special/show_3043714/ACRkYAQc9LIhIUwv.html 9 第一部分 细胞融合 10 一定义与意义 细胞融合（Cell fusion）是指用人工方法使两个或两个以上的细胞合并形成一个细胞的技术。 对于植物也叫“原生质体融合”。亲本细胞是体细胞，也叫“体细胞杂交（somatic cellhybridization）”。 由于它不仅能产生同种细胞融合，也能产生种间细胞的融合，因此细胞融合技术在创造新细胞、培育新品种方面意义重大。 11 二 细胞融合的分类 1.材料：原生质体（去除了细胞壁的裸露的细胞）、动物细胞。 2.从亲本来源： （1）同核体（Homokaryon）：基因型相同的细胞融合成的融合细胞。 （2）异核体（Heterokaryon）：来自不同基因型的融合细胞。 3.从融合效果： （1）对称融合（Symmetric fusion）：两个完整的细胞间的融合。 （2）不对称融合（Asymmetric fusion）：利用物理或化学方法使某亲本的核或细胞质失活后再与另外一个完整细胞进行融合。 12 13 原生质体A 原生质体B 同质融合（B+B） 异质融合（A+B） 同核体（BB） 异核体（AB） 核融合 B的核丢失 杂种细胞 （A+B） B的染色 体丢失 胞质杂种 不对称杂种 B的染色体 部分丢失 三 发展历史 自发融合现象最初在动物细胞中发现。1858年发现正常组织、发炎组织以及肿瘤组织中的多核细胞情况。动物体内的破骨细胞也是自发融合形成的多核细胞。 1962年日本学者发现一种叫日本血凝性病毒(HVJ)能引起艾氏腹水瘤细胞融合成多核细胞的现象。 20世纪70年代初，华裔加籍科学家高国楠发现聚乙二醇(PEG)能促使植物原生质体融合，开拓了植物细胞融合的研究。 20世纪80年代，齐默曼（Zimmerman）等建立电场诱导细胞融合方法。 14 15 主要环节 （1）亲本选择（单细胞或原生质体制备） （2）两原生质体或细胞互相靠近，粘附 （3）质膜融合形成细胞桥 （4）胞质渗透 （5）细胞核融合 （6）融合细胞筛选 16 原生质体及其制备 （1）定义： 去除细胞壁后裸露的细胞称之为原生质体（protoplast）。 （2）特点： 无细胞壁，可以方便地进行遗传操作、人工诱变、细胞器转移、细胞融合等操作。 具有全能性，能再生细胞壁。 17 （3）制备 18 19 两步法： 酶分离法 果胶酶处理材料 游离出单细胞 纤维素酶处理单细胞 分离出原生质体 优点： 所获得的原生质体均匀一致、质量好； 缺点： 操作复杂，已被淘汰。 20 一步法 外植体 酶