第12章色谱法要点.ppt

第一节 概述 第二节 气相色谱理论基础 第三节 气相色谱法 第四节 高效液相色谱法 第五节 色谱分离方式的选择 第一节 概述 Introduction 色谱法是现代分离分析的一个重要方法. 是对混合物分离测定的最有效方法。 俄国植物学家茨维特在1903年首次应用色谱法分离植物叶片中的各种色素。其中的一相固定不动，称为固定相；另一相是携带试样混合物流过此固定相的流体（气体或液体），称为流动相。装有固定相的管子（玻璃管或不锈钢管）称为色谱柱 一、色谱法简介 二、色谱法的分类 超临界流体色谱（SFC） 气相色谱（GC） 气固色谱（GSC） 气液色谱（GLC） 液相色谱（LC） 液固色谱（LSC） 液液色谱（LLC） 按两相物理状态分 柱色谱 平板色谱 纸色谱PC 薄层色谱TLC 填充柱色谱 毛细管色谱 按固定相的形式 吸附色谱(利用组分在吸附剂（固定相）上的吸附能力强弱不同而得以分离的方法) 分配色谱(利用组分在固定液（固定相）中溶解度不同而达到分离的方法) 离子交换色谱(利用组分在离子交换剂（固定相）上的亲和力大小不同而达到分离的方法) 排阻色谱(凝胶色谱）(利用大小不同的分子在多孔固定相中的选择渗透而达到分离的方法) 按分离过程的原理分 三、气相色谱分离过程及有关术语 (一)气相色谱分离过程 色谱分离过程是在色谱柱内完成的。 填充柱色谱:气固色谱和气液色谱，两者的分离机理不同。 气固色谱的固定相: 多孔性的固体吸附剂颗粒。 固体吸附剂对试样中各组分的吸附能力的不同。 气液色谱的固定相: 由 担体和固定液所组成。 固定液对试样中各组分的溶解能力的不同。 气固色谱的分离机理: 吸附与脱附的不断重复过程； 气液色谱的分离机理： 气液两相间的反复多次分配过程。 由于固定相对A、B两组分有不同的溶解能力或吸附能力，即A、B两组分在固定相和流动相之间的分配系数不同，因此，当A、B两组分随载气沿柱向出口方向不断移动时，就会产生速度之差(即差速迁移)而逐渐分离。分配系数小的组分（如A），则先被载气带出色谱柱进入检测器。 信号 色谱流出曲线 由检测器输出的电信号强度对时间作图，所得曲线称为色谱流出曲线(色谱图）。 （二）气相色谱常用术语 1、 色谱峰 曲线上突起部分就是色谱峰。 2、基线 无组分通过色谱柱时，检测器的噪音随时间变化的曲线。 3、峰高h 色谱峰顶点与基线之间的垂直距离为色谱峰高。 4、色谱峰区域宽度（峰宽） 色谱峰的区域宽度是色谱流出曲线的重要参数之一，用于衡量色谱柱的分离效能,反映色谱操作条件的动力学因素。 。通常希望区域宽度越窄越好。表示方法有以下三种： 峰底宽Wb 半宽W1/2 标准偏差? W1/2=2.354? Wb = 4 ?=1.699W1/2 5、保留值 保留值是试样各组分在色谱柱中保留行为的量度。是色谱定性分析和色谱过程热力学特性的重要参数。通常用保留时间和保留体积表示。 （1）死时间t 0——流动相流过色谱柱的时间 不被固定相吸附或溶解的物质（如空气）进入色谱柱时，从进样到出现峰极大值所需的时间称为死时间，它正比于色谱柱的空隙体积。 （2）保留时间tR— 指某组分通过色谱柱的时间。 试样从进样到出现某组分色谱峰极大点时所经过的时间，称为保留时间。 （3）调整保留时间tR′ 某组分的保留时间扣除死时间后，称为该组分的调整保留时间，即 tR′= tR ? t0 （4）死体积V0 指在死时间t0这段时间内通过色谱柱的载气体积。死体积实际上就是色谱柱内载气所占的体积。死体积可由死时间t0与色谱柱出口的载气流速Fo（cm3·min-1）计算。 V0 = t0Fo （5）保留体积VR 指从进样开始到被测组分出现色谱峰极大点时所通过的载气的体积。保留时间与保留体积关系： VR= tR F0 （6）调整保留体积VR? 某组分的保留体积扣除死体积后，称为该组分的调整保留体积。 VR? = VR ? V0 = tR? Fo (7)相对 保留值 指相同条件下,某组分2的调整保留值与组分1的调整保留值之比，称为相对保留值。