第九章DNA的生物合成要点.ppt

第九章DNA的生物合成 温州医学院生化教研室 李春洋 遗传是生物的重要特征之一，遗传信息存在于脱氧核糖核酸分子（DNA）中，DNA亦是遗传信息的载体。 DNA分子以基因为单位贮存着生物所有的遗传信息，基因是指DNA分子中一个功能性片段，其包含的遗传信息可指导合成RNA或蛋白质肽链，表现为特定的（脱氧）核苷酸排列顺序即遗传信息。 1944年，Avery和MacLeod以及McCarty通过肺炎双球菌DNA的转化实验证明DNA是遗传的物质基础。 遗传信息的传递过程 以亲代DNA为模板，合成与其碱基顺序完全一致的子代DNA，这一过程称为复制； 以某段DNA为模板，合成与其碱基顺序互补的RNA分子，这个过程称为转录； 以mRNA为模板，指导蛋白质的合成，mRNA上的碱基排列顺序决定蛋白质中氨基酸的排列顺序，这一过程称为翻译。 遗传信息的传递方向是从DNA到RNA再到蛋白质，Crick把遗传信息的传递规律称为分子生物学的“中心法则”。 生物体内DNA生物合成的方式：①复制 ②反转录 ③损伤DNA的修复合成 RNA RNA 蛋白质 蛋白质 复制 DNA 复制 第一节DNA 的复制 一、DNA复制的基本特点 （一）半保留复制 子代细胞的DNA，一股单链从亲代完整地接受过来，另一股单链则完全重新合成，两个子代细胞的DNA都和亲代DNA碱基序列一致，这种复制方式称为半保留复制。 1958年，Matthew Meselson和Francis stahl利用氮标记技术在大肠杆菌中首次证实了Watson和Crick的DNA的半保留复制假说。 （二）半不连续性复制 DNA解链并开始复制后，一条新链合成方向与复制叉移动方向相同，即以亲代3＇→5＇走向的单链为模板，即子链可沿5＇→3＇方向连续合成，这条新链称为领头链； 另一条链合成方向与 复制叉移动方向相反， 新链不能连续合成， 新链称为随从链。 领头链 随从链 复制叉 随从链的复制必须待模板链解链至一定长度才能进行复制，随复制叉延伸过程，可合成许多DNA片段，称为冈崎片段。 DNA复制时领头链连续复 制，随从链不连续复制 的方式称为DNA的半不连 续复制。 冈崎片段 （三）双向复制 DNA的复制是在特定的起始部位开始的，复制时DNA双链从起始点开始向两个方向解旋，形成两个移动方向相反的复制叉，称为双向复制。 无论原核生物还是真核生物，由于基因组都十分庞大，都采用双向复制形式进行DNA的合成。 （四）复制的高保真性 严格遵守碱基配对规律； 聚合酶在复制延长中对碱基的选择功能； 复制出错有即时的校读功能。 二、DNA复制的反应体系 模板——指解开成单链的DNA母链； 底物(原料）——即dATP、dCTP、dGTP、dTTP，总称dNTP； 引物——提供3＇-OH末端使dNTP可以依次聚合； 聚合酶——依赖DNA的DNA聚合酶，简称DNA-pol； 其他的酶和蛋白质因子 2.引物酶 引物酶又称为引发酶，是一种以DNA为模板的特殊的RNA聚合酶，可催化短片段RNA的合成。 RNA片段一般是十几个至数十个核苷酸不等，它们在DNA复制起始处作为引物（提供3＇-OH）而起作用。 在复制完成后，引物被水解除去。 3.解酶和解链酶类 （1）解螺旋酶 解螺旋酶能解开DNA的双螺旋，其作用是在复制叉前解开一小段DNA，每解开一对碱基对需消耗2个ATP。 解螺旋酶具有依赖DNA的ATP酶活性，能水解ATP使双螺旋DNA沿DNA链解旋和解链，作为模板引导DNA新链的合成。 在复制过程中，解链酶可沿着模板随着复制方向的伸展而移动 （2）拓扑异构酶 在DNA复制过程中，拓扑异构酶对DNA分子兼有内切酶和连接酶功能，并且断裂和连接反应是偶联的。 原核生物和真核生物中都有两类拓扑异构酶：拓扑异构酶Ⅰ和拓扑异构酶Ⅱ。 （3）单链DNA结合蛋白（SSB） SSB的作用主要是防止单链重新形成双螺旋，使其保持单链状态，便于复制； SSB能够稳定解开的DNA单链结构，防止其被核酸酶水解，以利于其发挥模板功能； SSB与DNA模板链不断结合、脱离，可反复利用，表现为协同效应。 4. DNA连接酶 DNA连接酶的作用是催化一个DNA片段的3＇-OH末端和另一个DNA片段的5＇-P末端生成3＇，5＇-磷酸二酯键，从而将两个相邻的DNA片段连接成完整的链，这一反应需要ATP供能。 DNA连接酶不但在DNA复制中起作用，而且在DNA损伤的修复、重组和剪接中也起缝合缺口作用。 三、原核生物的DNA生物合成 （一）复制的起始 （二）复制的延长 （三）复制的终止 四、真核生物DNA的复制过程 （一）真核生物DNA复制的特点 多复制子复制 冈崎片段短 起始过程复杂 真核生物的DNA复制与核小体装配同步进行 端粒DNA的合成 （二）DN