第六章生物制药分离纯化技术绪论要点.ppt

第六章 生物制药分离纯化技术绪论 目 录 第一节 概述 第二节 生物药物的分离纯化原则 第三节 生物药物的分离纯化 第四节 分离纯化的基本工艺流程 知识要求 掌握分离纯化的基本原理、工艺流程。 熟悉生物制药分离纯化的单元操作。 了解生物制药分离纯化的原材料的来源，分离纯化的原则与准备 能力要求 熟练掌握生物制药分离纯化技术的基本知识，学会分离纯化方法的选择与相关应用。 学习目标 生物药物是指综合运用微生物学、化学、生物化学、生物技术、药学等科学的原理和方法，从生物体、生物组织、细胞、体液等制造的用于预防、治疗和诊断的制品。生物药物原料以天然的生物材料为主，包括微生物、人体、动物、植物、海洋生物等。生物药物的特点是药理活性高、毒副作用小，主要有蛋白质、核酸、糖类、脂类等。 第一节 概述 一、生物药物制备的一般过程 （一）生物药物原料的选择、预处理与保存方法 （三）生物药物的分离提取方法 1.组织与细胞的破碎 2．提取试剂 预处理：原料采集后，就地去除结缔组织、脂肪组织等不用的部分，将有用的保鲜处理。收集微生物原料时，应及时将菌体与培养液分开，进行保鲜处理。 保存方法：冷冻法，适用于所有生物原料。 有机溶剂脱水法（如丙酮）：适用于原料少、价值高。有机溶剂对原料生物活性无影响。 1.原料选择原则 2.预处理与保存 防腐剂保鲜：常用乙醇、苯酚等，适用于液体原料，如发酵液、提取液。 1. 根据分子形状和大小不同，可采用差速离心与超速离心、膜分离（透析，电渗析）、超滤、凝胶过滤等等技术进行分离。 2. 根据分子极性大小及溶解度不同，可采用溶剂提取、逆流分配、分配层析、盐析、等电点沉淀及有机溶剂分级沉淀等技术进行分离。 3. 根据分子电离性质的差异，可采用离子交换、电泳、等电聚焦等技术进行分离。 二、 生物药物分离、纯化、精制的基本原理 4. 根据配体特异，可采用亲和层析技术进行分离。 5. 根据物质吸附不同，可采用选择性吸附与吸附层析等技术进行分离。 三、生物药物与原材料 微生物发酵产物 细胞培养产物 动植物器官组织 昆虫细胞培养产物 4.对于基因工程产品应注意生物安全问题， 即应防止菌体扩散，在密封环境下操作。 3.发酵或培养是分批操作，生物变异性大，各批发酵液不尽相同，因此分离应有一定的弹性。 2.待分离的生物药物一般稳定性差，加热、pH值、有机溶剂等可引起失活或分解，特别是蛋白质、核酸药物，应尽量减少分离操作步骤。 四、生物制药下游技术的特点 1.培养液（或发酵液）中所含欲分离的生物药物浓度很低，杂质含量却很高，常需多步分离操作。 第二节 生物药物的分离纯化原则 概 述 1. 抑制宿主细胞或分泌产物中相应的酶活性，防止其消化降解待提纯产物。 2. 发酵液或培养液中的非目标成分对人体常常是有害的，如外源蛋白和多肽可引起过敏反应，应尽量去除细胞或分泌产物中非目标产物成分，使目标产物成分有较高的纯度。 3. 注意每个生产环节的时效性，对每一步骤的质量应进行监控，以保证生物药物的安全、有效。 4.尽可能优化分离纯化工艺，减少分离步骤，降低生产成本。 4 第三节 生物药物的分离纯化 溶剂与试剂 pH 添加物 分离纯化前准备 三、 添加物 防止生物活性分子聚合、阻止药物与杂质结合、洗脱 加入防腐剂以防止微生物的生长 酶抑制剂 防腐剂 金属螯合剂 去垢剂 防止重金属离子对蛋白质的生物活性的损害 提取早期加入酶抑制剂 四、生化药物分离纯化前的准备 准备 原料的取用 除菌 质量检测与贮存 设备与器具 第四节 分离纯化的基本工艺流程一、分离纯化的工艺流程与单元操作 [ Image information in product ] Image : Note to customers : This image has been licensed to be used within this PowerPoint template only. You may not extract the image for any other use. 第四节 分离纯化的基本工艺流程一、分离纯化的工艺流程与单元操作 [ Image information in product ] Image : Note to customers : This image has been licensed to be used within this PowerPoint template only. You may not extract the