第十一章细胞增殖及其调控要点.ppt

第十一章 细胞增殖 狭义的细胞生长：细胞大小的增加 广义的细胞生长：还包括细胞分裂和细胞分化 细胞增殖：指细胞的增加或繁殖，是经过多次细胞分裂而使细胞数量快速膨胀的过程 第一节 细胞周期的概念 一、什么是细胞周期 细胞周期指由细胞分裂结束到下一次细胞分裂结束所经历的过程，所需的时间叫细胞周期时间。 可分为四个阶段： ①G1期(gap1)，指从有丝分裂完成到DNA复制之前的间隙时间； ②S期(synthesis phase)，指DNA复制的时期，只有在这一时期H3-TdR才能掺入新合成的DNA中； ③G2期(gap2)，指DNA复制完成到有丝分裂开始之前的一段时间； ④M期又称D期(mitosis or division)，细胞分裂开始到结束。 分裂间期 分裂期 ① 周期中细胞（cycling cell）：是指在细胞周期中连续运转 的细胞，有丝分裂活性高，又称为连续分裂细胞或可育细胞，如表皮生发层细胞、部分骨髓细胞、造血干细胞、雄性个体的生精细胞等。 ② 静止期细胞（quiescent cell）：指的是暂时离开细胞周期，停止细胞分裂，去执行一定的生物学功能，但在适当的刺 激下可重新进入细胞周期的细胞，又称为G0期细胞或休眠细胞，如淋巴细胞、肝、肾细胞等。 ③ 终末分化细胞：指不可逆地脱离细胞周期，丧失分裂能力， 保持生理机能活动的细胞，又称终端细胞，如神经、肌肉、多形核细胞、红细胞等。 细胞周期的时间长短与物种的细胞类型有关，如：小鼠十二指肠上皮细胞的周期为10小时，人类胃上皮细胞24小时，骨髓细胞18小时，培养的人成纤维细胞18小时，CHO细胞14小时，HeLa细胞21小时。不同类型细胞的G1长短不同，是造成细胞周期差异的主要原因。 细胞周期长短的测定 同种细胞间周期时间长短相似或相同；不同种类细胞间， 周期长短差别很大。 S+G2+M 的时间变化较小，细胞周期时间长短差别在G1期。 部分细胞的细胞周期没有G1、G2期。 细胞周期长短的测定方法 标记有丝分裂百分数法（percentage labeled mitoses，PLM） 流式细胞分选仪测定法(Flow Cytometry) 缩时摄像技术 原理：是一种常用的测定细胞周期时间的方法。其原理是对测定细胞进行脉冲标记、不同时间取样做细胞放射性自显影，找出正处于有丝分裂的分裂期细胞，计算其中带3H标记的细胞占有丝分裂细胞的百分数。 优点：可以测定细胞周期的总时间和各阶段的时间，结果明了易分析。 缺点：操作技术有一定的难度；具有一定的危险性；同位素的放射性逐渐衰减，误差较大。 标记有丝分裂百分数法（PLM) 测定原理： ① 待测细胞经3H-TdR标记后，所有S期细胞均被标记。 ② S期细胞经G2期才进入M期，所以一段时间内PLM=0。 ③开始出现标记M期细胞时，表示处于S期最后阶段的细胞，已渡过G2期，所以从PLM=0到出现PLM的时间间隔为TG2。 ④ S期细胞逐渐进入M期，PLM上升，到达到最高点的时候说明原先才进入M期的细胞，已完成M，进入G1期。所以从开始出现PLM到PLM达到最高点（≈100%）的时间间隔就是TM。 ⑤ 当PLM开始下降时，表明处于S期最初阶段的细胞也已进入M期，所以出现PLM到PLM又开始下降的一段时间等于TS。 ⑥ 从PLM出现到下一次PLM出现的时间间隔就等于TC，根据TC=TG1+TS+TG2+TM即可求出的TG1长度。 细胞周期各阶段的时间与PLM的关系 Ts 二、细胞周期同步化 概念：细胞同步化是指在自然过程中发生的，或经人为处理 造成的细胞周期的同步化。 类型：自然同步化 人工同步化：选择同步化：有丝分裂选择法 细胞沉降分离法 诱导同步化：DNA合成阻断法 中期阻断法 (一）自然同步化 概念：自然界存在的细胞周期同步过程，称为自然同步化。 类型： 1．多核体 如粘菌只进行核分裂，而不发生胞质分裂，形成多核体。数量众多的核处于同一细胞质中，进行同步化分裂，使细胞核达108，体积达5~6cm。疟原虫也具有类似的情况。 2．某些水生动物的受精卵 如海胆卵可以同时授精，最初的3次细胞分裂是同步的，再如大量海参卵受精后，前9次细胞分裂都是同步化进行的。 3．增殖抑制解除后的同步分裂 如真菌的休眠孢子