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壳聚糖、海藻酸钠、百里香酚对灵武长枣采后主要病原菌抑菌效果的研究
答辩人:苏振峰
学 号 指导老师:任玉锋
2010届本科毕业论文答辩
主要内容
一、研究的意义
二、研究的内容
三、研究的方法
四、结果与分析
五、结论
六、致谢
一、研究的意义
壳聚糖﹑百里香酚﹑海藻酸钠对食品中常见的腐败菌都具有一定的抑菌作用,可作为天然食品防腐剂的重要成分。灵武长枣是宁夏灵武有地方特色的优良枣树品, 其个大、色泽艳丽、果肉致密酥脆、酸甜适口、汁液较多,鲜枣含糖量250~300 g/kg ,Vc含量达3~4 g/kg,是集营养、保健于一体的优质果品,目前已成为宁夏最热销的水果之一。灵武长枣在贮藏中因真菌病害浸染而导致的腐烂率达30%~40%。随着灵武长枣栽种面积的不断扩大,枣果产量逐年增加,市场销售的压力将会逐年加大,这将严重制约灵武长枣产业的快速发展。因此,研究采后病害的种类及其防治方法,是灵武长枣贮藏保鲜技术中一项亟待解决的主要问题,已成为产业发展的关键。
本文研究以宁夏灵武长枣在贮藏过程中所分离的四种病原真菌——链格孢、粉红聚端孢、青霉属、黑根霉为研究对象,用滤纸片扩散法等方法,研究壳聚糖﹑百里香酚﹑海藻酸钠3种保鲜剂对这四种病原真菌的抑制效果。以延长灵武长枣的贮藏期,为宁夏灵武长枣产业的发展做出我们的贡献。
二、研究的内容
(一)壳聚糖、海藻酸钠、百里香酚溶液对供试菌抑
菌效力的影响
(二)壳聚糖、海藻酸钠、百里香酚溶液的MIC
(三)壳聚糖、海藻酸钠、百里香酚溶液不同pH对供试菌的抑菌活性影响
三、研究的方法
(一)滤纸片扩散法:将滤纸用打孔器制成直径为6mm的圆片,灭菌锅灭菌30min。把灭菌后的滤纸片放入壳聚糖、海藻酸钠、百里香酚、壳聚糖-百里香酚和海藻酸钠-百里香酚溶液中浸泡一小时,然后干燥备用。分别吸取四种供试菌悬液100μl,加入培养基中并涂布均匀。用无菌镊子将药液浸泡过的滤纸片分别放入含有菌的培养皿中,每皿均匀放三片,每处理做三个重复,放入25℃-28℃的恒温培养箱中培养24-72h,量取抑菌圈直径,结果取三皿的平均值,比较壳聚糖、海藻酸钠、百里香酚、壳聚糖-百里香酚和海藻酸钠-百里香酚对各种实验真菌的抑菌效力,用无菌水做对照组。
(二)测定壳聚糖、海藻酸钠、百里香酚、壳聚糖-百里香酚和海藻酸钠-百里香酚对4种供试菌的最低抑菌浓度。 壳聚糖的浓度为2%、1.0%、0.5%、0.25%、0.125%、0.0625%、0.03125%、0.015625%的培养基; 海藻酸钠的浓度为2%、1.0%、0.5%、0.25%、0.125%、0.0625%、0.03125%、0.015625%的培养基; 百里香酚的浓度为2%、1.0%、0.5%、0.25%、0.125%、0.0625%、0.03125%、0.015625%的培养基; 壳聚糖-百里香酚的浓度为2%、1.0%、0.5%、0.25%、0.125%、0.0625%、0.03125%、0.015625%的培养基; 海藻酸钠-百里香酚的浓度为2%、1.0%、0.5%、0.25%、0.125%、0.0625%、0.03125%、0.015625%的培养基; 待培养基凝固后,用无菌打孔器打孔,孔径为5mm,之后每个浓度用菌饼反贴法分别接入4种供试菌,培养24-72h,观察其生长,测定菌落的直径。
(三)用1mol/L盐酸或1mol/L氢氧化钠溶液将壳聚糖、海藻酸钠、百里香酚、壳聚糖-百里香酚和海藻酸钠-百里香酚分别调制成pH为4.4、5.4、6.4、7.4,制成平板后分别吸取四种供试菌悬液100μl,加入培养基中并涂布均匀,用无菌镊子将上述不同pH的药液浸泡过的滤纸片分别放入含有菌的培养皿中,每皿均匀放三片,每处理作三个重复,每个pH用无菌水作对照,然后放入25℃-28℃的恒温箱中培养,培养24-72h,观察结果,测定抑菌圈直径,比较不同pH条件下,对供试菌的影响。
四、结果与分析
4.1 壳聚糖、海藻酸钠、百里香酚的抑菌效力
由表4.1可知,以上五种溶液对4种供试菌都有不同程度的抑制作用 ,对同一种供试菌而言,壳聚糖-百里香酚混合液的抑菌效力最好,海藻酸钠最差;由五种溶液对4种供试菌的抑制效力来看,黑根霉最难抑制 ,其次是青霉属、链格孢较难抑制,粉红聚端孢是最容易抑制的 。
供试菌株
抑菌圈直径(mm)
CK
壳聚糖
海藻酸钠
百里香酚
壳聚糖-百里香酚
海藻酸钠-百里香酚
黑根霉
6
11.00
8.89
13.06
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