电子显微镜技术及其在病理诊断上的应用
一、电子显微镜技术:
也称电子显微技术
或电子显微术
发明背景:
电子束具有波动性质及利用磁场改变电子束行径,在上述理论的指导下发明使用。
电子显微镜的类型:
透射电子显微镜:观察样品内部超微结构。
扫描电子显微镜:展示样品表面形貌。
扫描电镜和透射电镜比较
项目
扫描电镜
透射电镜
分辨本领
70~100 ?
2 ?
发大倍数
20~40万倍
100万倍
加速电压
1~50 KV
几十千伏~几百千伏
图像特点
景深长、三维立体结构
景深小、两维平面结构
样品制备
固定-脱水-临界点干燥-喷涂金属
固定-脱水-包埋-超薄切片-重金属染色
样品尺寸
1cm3
50~100nm切片
样品损伤
光斑直径只有几十埃的电子束在
样品上扫描,对样品损伤极小
大约1μm直径电子束打到样品上,造成一定程度损伤
样品成像信号
二次电子、背散射电子
透射电子
发大倍数调节
用衰减器改变扫描线圈电流,进
行放大率调节
调整中间镜电流改变放大率
决定分辨率
因素
入射电子束直径决定图像分辨率。
加速电压、透镜缩小率、电源稳定度及像差决定电子束斑直径
加速电压、电源稳定度、像差、样品厚度等影响分辨率
样品的制备
透射电镜样品制备的常用方法:包括超薄切片、冷冻复型、负染色等。
扫描电镜样品制备:除保存样品表
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