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本章内容
微生物对氧的需求 (为什么要供氧?为什么要控制溶氧?)
发酵过程中氧的传递(如何实现供氧?如何控制溶氧?)
发酵过程耗氧与供氧的动态关系
影响氧传递的因素
发酵过程中氧传递效率
摄氧率、溶解氧、KLa的测定
微生物对氧的需求
(一)氧在微生物发酵中的作用
(二)可利用氧的特征
(三)微生物的耗氧特征
(四)溶解氧控制的意义
(一)氧在微生物发酵中的作用(对于好气性微生物而言)
呼吸作用
直接参与一些生物合成反应
(二)可利用氧的特征
只有溶解状态的氧才能被微生物利用。
氧在水中的溶解度0.25mol/m3, 在发酵液中更小,0.21mol/m3
(三)微生物的耗氧特征1. 微生物需氧量的表示方式
(1) 呼吸强度(比耗氧速率) QO2 :单位质量干菌体在单位时间内消耗氧的量。单位:mmolO2/(kg干菌体·h)。
(2) 摄氧率γ(耗氧速率):单位体积发酵液在单位时间内消耗氧的量。单位:
γ=QO2·X
X—以干菌体质量表示的细胞浓度,kg(干重)/m3
2. QO2与溶氧浓度CL关系
k0: 亲和常数(半饱和常数). k0越大,亲和能力越小。
不同微生物的k0特征值不一样,可以此作为通气操作的依据。
Ccr:临界氧浓度。各种微生物对发酵液中溶氧浓度有一个最低要求,即不影响呼吸所允许的最低溶氧浓度。
酵母 4.6*10-3 mmol.L-1, 1.8%
产黄青霉 2.2*10-2 mmol·L-1, 8.8%
(1) 当CLCcr时, QO2= (QO2)m
(2) 当CL Ccr时, QO2随CL降而降
酵母的呼吸强度与溶氧浓度的关系
3. 培养过程中细胞耗氧的一般规律
培养初期: QO2逐渐增高,x较小, γ也较小。
在对数生长初期:达到(QO2 )m,但此时x较低,
γ并不高。
在对数生长后期:达到γm, 此时
QO2 (QO2 )m , xxm
D. 对数生长期末:S↓, OTR↓, QO2 ↓
而γ∝(QO2 , x , OTR), 虽然x=xm,但 QO2、 OTR 占主导地位,所以 γ↓
E. 培养后期:S→0,QO2 ↓↓, γ↓↓
疣孢漆斑霉在分批培养时呼吸强度的变化
4. 影响微生物耗氧的因素
微生物本身遗传特征的影响,如 k0↑,QO2↓
培养基的成分和浓度
碳源种类
耗氧速率:油脂或烃类葡萄糖 蔗糖 乳糖
培养基浓度
浓度大, QO2 ↑; 浓度小, QO2↓
菌龄的影响:一般幼龄菌QO2大,晚龄菌QO2小
发酵条件的影响
pH值→ 通过酶活来影响耗氧特征;
温度→ 通过酶活及溶氧来影响耗氧特征:T ↑, DO2 ↓?
代谢类型(发酵类型)的影响
若产物通过TCA循环获取,则QO2高,耗氧量大
若产物通过EMP途径获取,则QO2低,耗氧量小
溶解氧浓度对细胞生长和产物合成的影响可能是不同的,所以须了解长菌阶段和代谢产物形成阶段的最适需氧量。
eg. 谷氨酸发酵
氧传递速率已成为许多好气性发酵产量的限制因素。
氧的溶解度低,通气时空气中氧的利用率低,因此提高传氧效率,就能大大降低空气消耗量,从而降低设备费和动力消耗。
(四)溶解氧控制的意义
发酵过程中氧的传递
(一)供氧的实现形式
(二)发酵过程中氧的传递
1. 氧的传递途径与传质阻力
2. 气体溶解过程的双膜理论
3. 氧传递方程
(一) 供氧的实现形式
摇瓶水平:摇床转速慢,装量多
搅拌缓和,通气缓和
表面通气,膜透析(扩散)
摇瓶水平:转速快,装量少
通无菌空气并搅拌
气升式
发酵罐水平
发酵罐
(二)发酵过程中氧的传递1.氧的传递途径与传质阻力
氧从气泡到细胞的传递过程示意图
气膜传递阻力1/kG
气液界面传递阻力1/kI
液膜传递阻力1/kL?
液相传递阻力1/kLB
细胞或细胞团表面的液膜阻力1/kLC
固液界面传递阻力1/kIS
细胞团内的传递阻力1/kA
细胞膜、细胞壁阻力1/kW
反应阻力1/kR
供氧方面的阻力
耗氧方面的阻力
供氧方面主要阻力是气膜和液膜阻力
耗氧方面主要阻力是细胞团内与细胞膜阻力
2. 气体溶解过程的双膜理论
气泡
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