骨髓细胞形态学
张红
河北医科大学第四医院
血液和骨髓细胞瑞氏染色形态学检查法
通过分析血液和骨髓中有核细胞数量、相对构成比、形态改变,了解骨髓造血功能状态和异常改变的形态学检查方法。
形态学检查方法的价值
发现血细胞构成和形态异常
了解骨髓造血功能状态
对血液病提供确诊依据或提供重要线索
是各种血液病形态学检查的基础
形态学检查方法的局限性
不能了解骨髓结构
不能了解细胞分子生物学特性和功能
内 容
第一部分 标本制作
第二部分 单个血细胞形态
第三部分 骨髓和外周血有核细胞构成比
第四部分 常见血液病形态学表现
第五部分 骨髓报告书写格式
第一部分
标 本 制 作
一、骨髓血细胞检查适应症
多次检查外周血有异常(数量、形态)
原因未明的肝、脾、淋巴结肿大
不明原因的发热
恶性肿瘤史 有无转移,不名原因骨痛、骨质破坏等。
助诊溶酶体贮积症(即类脂质沉积病)
进行血液病鉴别诊断和疗效观察
骨髓血细胞检查禁忌症
凝血因子严重缺乏的出血性疾病,如血友病。
穿刺部位有炎症或畸形
晚期妊娠的妇女做髂骨穿刺要谨慎
二、血液和骨髓标本的来源
部位: 髂前上棘或髂后上棘穿刺
必要时行胸骨穿刺,胫骨(儿童)
骨髓穿刺成功的标志:
1.抽吸骨髓时患者感锐痛
2.外观红色粘稠状、有骨髓小粒、油滴。
3.显微镜下见有骨髓成分(如幼红细胞、幼粒细胞、巨核细胞、浆细胞、网状细胞等)
三、血液和骨髓标本的制作
四、血液和骨髓标本的瑞氏染色
选取长短厚薄适宜的涂片 (骨髓2张、血片1张)
瑞氏-姬姆萨染液:缓冲液 1:2,时间15分钟,小水流冲洗,自然晾干或滤纸吸干后备检。
瑞氏-姬姆萨染液含亚甲蓝和曙红两种成分
亚甲蓝偏碱性,与细胞内酸性物质有亲和力(胞 浆),染成兰色;
曙红偏酸性,与细胞内碱性物质有亲和力(胞核),染成紫红色。
偏酸 合适 偏碱
光学显微镜使用
低倍镜(10倍):
1. 判断取材、涂片、染色是否满意
2.骨髓增生程度
3.计数全片巨核细胞数目
4. 注意有无异常细胞:如转移癌细胞、巨大异常组织细胞等
5.选择适宜的油镜检查区域
增生程度分级
增生程度 RBC与有核细胞之比 常见病
增生极度活跃 1:1 各类白血病
增生明显活跃 10:1 各类白血病 增贫
增生活跃 20:1 正常骨髓、某些贫血
增生减低 50:1 慢性再障、MDS
增生极度减低 300:1 急性再障 、急停
油镜下(100倍):
1.判断骨髓取材和涂片情况
2.有核细胞分类计数
3.观察细胞形态
4.粒/红比值(M:E)计算:参考值2-4:1.
第二部分
正常骨髓细胞形态
(一) 骨髓细胞分化
正常情况下,在造血干细胞分化、发育、成熟的整个演变过程中,存在一定的规律性。造血干细胞逐级分化形成各系列、各阶段的骨髓血细胞,造血干、祖细胞在形态上无法鉴别,分化发育为各系列原始、幼稚细胞后,其形态学特征才较明显,才能辨认。
1-2 单个细胞观察顺序
细胞大小、形状
胞浆量多少、颜色、颗粒
细胞核形状、染色质结构(粗细、凝聚)、核仁数目、大小。
核、浆比例。
正常骨髓有核细胞 构成比
第三部分
粒细胞系统:占骨髓有核细胞百分比45-75%
各 阶段比例:
原+早2.2%(5%) ,中性中幼粒约6±2%
中性晚幼粒约8±2%, 中性杆状核23±4%,中性分叶核约9±3,
嗜酸性粒细胞(中幼粒-分叶核)5%
嗜碱性粒细胞(中幼粒-分叶核)0-1%。
红细胞系统
占骨髓有核细胞百分比15-25%
原始红细胞约0.2-1.3%,早幼红约0.5-2.4%,中幼红约 10%,
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