实验原理:
某些化学试剂能够使生物组织中的有关有机化合物产生特定的颜色反应。
还原糖 + 斐林试剂→砖红色沉淀
脂肪 + 苏丹Ⅲ→橘黄色
蛋白质 + 双缩脲试剂→紫色
淀粉 + 碘→蓝色
一:检测生物组织中的还原性糖类
1)实验原理:
还原糖(葡萄糖、果糖、麦芽糖) + 斐林试剂→砖红色沉淀
2)实验材料:苹果汁或梨匀浆
3)试剂:斐林试剂
甲液:质量浓度为0.1g/mL的NaOH溶液
乙液:质量浓度为0.05g/mL的CuSO4溶液
①向试管内注入2mL待测组织样液。
②向试管内注入1mL斐林试剂(甲乙液等量混合均匀后再注入)。
③将试管放入盛有50~65℃温水的大烧杯中加热约2min。
④观察试管中出现的颜色变化。
4) 检测的方法步骤
5)实验现象
颜色变化:
蓝色沉淀(Cu(OH)2)
棕色沉淀
砖红色沉淀(Cu2O)
注意事项:
结论:可溶性还原糖与斐林试剂在水浴加热的过程中生成砖红色沉淀,说明组织样液中有可溶性还原糖。
斐林试剂要现用现配,要将甲液和乙液混合均匀后再使用,并进行水浴加热。
时间太长,Cu(OH)2悬浊液就沉淀在试管底部而无法参与反应。
选材
切片
制片
镜检
(选取切片、染色、去浮色、制临时装片)
染色:滴2-3滴苏丹Ⅲ,染色3min;或苏丹Ⅳ,染色1min。
去浮色:滴1-2滴50%的酒精溶液
结论:圆形小颗粒呈
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