第六章核苷酸与核酸NucleotidesandNucleicAcids.ppt

第 六 章核苷酸与核酸Nucleotides and Nucleic Acids 核酸的发现和研究工作进展 1869年 Fridrich Miescher从脓细胞中提取“核素” 1944年 Avery等人证实DNA是遗传物质 1953年 Watson和Crick发现DNA的双螺旋结构 1968年 Nirenberg发现遗传密码 1975年 Temin和Baltimore发现逆转录酶 1981年 Gilbert和Sanger建立DNA 测序方法 1985年 Mullis发明PCR 技术 1990年 美国启动人类基因组计划(HGP) 1994年 中国人类基因组计划启动 2001年 美、英等国完成人类基因组计划基本框架 （一）核酸中的碱基分为嘧啶碱和嘌呤碱两类 2．核酸中存在稀有碱基 （二）核苷酸中的戊糖有核糖和脱氧核糖两类 核糖核苷酸：β-D-核糖 脱氧核糖核苷酸： β-D-2?-脱氧核糖 （三）碱基和和戊糖缩合成核苷酸 1.　碱基和戊糖缩合成核苷 β-N-糖苷键 2.　糖苷键是可以旋转 碱基位置存在顺式和反式结构 体内重要的游离核苷酸及其衍生物 含核苷酸的生物活性物质： NAD+、NADP+、CoA-SH、FAD 等都含有 AMP 3?, 5?-磷酸二酯键 四、核酸分为核糖核酸和脱氧核糖核酸两类 （一）RNA是单链多聚核糖核苷酸 （二）DNA是单链或双链多聚脱氧核糖核酸 （三）组成DNA和RNA成分不同 （四）多聚核苷酸中核苷酸的排列顺序是核苷酸的基本结构 五、核苷酸还有其他功能 脱氧核苷酸主要的作用是DNA的组成成分，为数不多的参与代谢的调节。 核糖核苷酸除了是RNA的组成成分外，还以多种方式参与细胞内的生理和生化过程。 DNA的二级结构是双螺旋结构 DNA双螺旋结构的研究背景和历史意义 DNA双螺旋结构模型要点 DNA的超螺旋结构及其在染色质中的组装 DNA的超螺旋结构 原核生物DNA的高级结构 DNA在真核生物细胞核内的组装 DNA的功能 不同生物来源的DNA碱基组成(摩尔，mole)与碱基比（mole比） DNA双链模型 不同类型的DNA双螺旋结构 （四）某些DNA 具有更复杂的螺旋结构 H-DNA的结构 2． 4条多聚鸟嘌呤核苷酸链形成四螺旋DNA 碱基序列依赖性的局部DNA 可形成发夹形或十字形结构 （三）拓扑异构酶改变超螺旋的数量和类型 三、真核生物DNA与组蛋白组成高度有序的染色体 （一）核小体(nucleosome)是染色质的基本组成单位，由DNA和蛋白质构成 。 端粒酶 四、DNA是遗传的物质基础 （一） tRNA分子含有较多稀有碱基 含 10% ~20% 稀有碱基，如 DHU 3?末端为 — CCA-OH 5?末端大多数为G 具有 T?C 核酸的酸碱及溶解度性质 核酸为多元酸，具有较强的酸性。 可与金属离子成盐，不溶于乙醇或异丙醇 （二）碱基在体液环境中以碱性解离为主 （三）核酸分子是酸性化合物 三、核酸溶液有高分子性质 粘度 ： DNA 〉RNA dsDNA 〉ssDNA 沉降系数： 溶液中的核酸在离心力场中可下沉。DNA分子经反复盘曲形成超螺旋后，其沉降系数增加，超螺旋松解后其沉降系数减小。 四、核酸有紫外线吸收的特性 核酸的紫外吸收（OD260） 单核苷酸 〉ssDNA（或RNA） 〉dsDNA 热变性 解链曲线：如果在连续加热DNA的过程中以温度对A260(absorbance, A, A260代表溶液在260nm处的吸光率)值作图，所得的曲线称为解链曲线。 2. 具有同源序列的核酸分子可相互杂交 在DNA变性后的复性过程中，如果将不同种类的DNA单链分子或RNA分子放在同一溶液中，只要两种单链分子之间存在着一定程度的碱基配对关系，在适宜的条件（温度及离子强度）下，就可以在不同的分子间形成杂化双链（heteroduplex）。 这种杂化双链可以在不同的DNA与DNA之间形成，也可以在DNA和RNA分子之间或者RNA和RNA分子之间形成。这种现象称为核酸分子杂交（hybridyzation）。 第 五 节核 酸 酶 Nucleases  （二）按对底物作用方式不同分类 核酸内切酶：分为限制性核酸内切酶和非特异性限制性核酸内切酶。 核酸外切酶：5?→3?或3?→5?核酸外切酶。 （三）按对底物二级结构的专一性分类 双链酶：作用于双链核酸 单链酶：作用于单链核酸 二、核糖核酸酶是一类RNA内切酶 （一）胰核糖核酸酶识别嘧啶核苷酸 （二）核糖核酸酶T1识