生物电镜重点要点.doc

生物电镜重点 亚显微结构：介于细胞水平和大分子水平之间的结构，简称亚微结构，亚细胞结构，细微结构。 超微结构：严格的讲是指分子水平的结构。 ### 分辨率：D=0.61λ/N*sin(α/2)，其中D为分辨率，λ为光波波长，N为介质折射率，α为物镜镜口角。1m=10dm=100cm=1000mm=106um=109nm=1012pm=1015fm=1018am ### 光学显微镜分辨本领为光源波长的一半。（用香柏油的情况下）### 分辨本领指一个显微镜能分辨的最小微体，从理论上而言，指能力。由于各种原因，在像中所再现的最小细微部分可能大于或小于仪器的分辨本领，叫做分辨率，指效果。肉眼分辨率0.2mm，光镜的分辨率0.2um，电镜的分辨率0.2nm。M有效=δ肉眼/δ仪器，δ指分辨率，肉眼的分辨率为0.2mm，电镜的分辨率为0.2nm，故而该电镜的分辨率为100W倍。### 电子显微镜的分类：一，透射电镜（tem）：收集直接透过样品的电子并成像。二，扫描式电子显微镜（sem）：将从样品表面反射出的电子收集并使他们成像。三：扫描透射电子显微镜：兼具以上二者功能。### 电镜技术的应用：一，线粒体、高尔基体、内质网、溶酶体、中心体等细胞器还有细胞骨架系统；二，生物大分子：核酸，蛋白质，脂质；三，细胞中的化学成分：ATP、CAMP、含硫蛋白质，粘多糖、Ca2+，Mg2+，Fe2+，Na2+，K+；四，病毒；五，直接研究活细胞。### 电镜技术的未来：一，纵向联系不断深入，用不同手段对同一种材料多角度的观察，如超薄切片法，冷冻蚀刻法。二，横向联系不断扩展，多种显微技术和其他物理技术与电镜技术相结合，研究某一课题，如扫描隧道显微镜，原子力显微术。三，仪器将继续更新，四，样品制备技术不断完善。### Airy盘半径通常以第一级暗环的半径R表示，R=0.612λ/n*sinα，其中λ表示光在真空中的波长，α表示入射孔径角的一半，n表示透镜与物体间介质的折射系数。### 分辨本领等于Airy盘的半径r，即Abbe公式δ=0.612λ/nsinα，数值孔径=nsinα，提高分辨本领的方法：增大数值孔径，减小波长。### 光学显微镜的极限分辨本领不小于0.2um。放大极限倍数2000倍，提高分辨本领只能减小波长，可见光（0.39-0.76um）### 德布罗意波λ=h/mv，h普朗克常量，m指物质质量，v指物体速度### 电子波的波长比可见光短得多，这是电镜分辨本领高的根本原因。对电子显微镜来说限制分辨本领的不是波长是透镜像差。透镜的极限分辨本领1.4A，点分辨本领3A。### 电子透镜原理：带电粒子在电场或磁场中发生偏转，沿一光轴成旋转对称的电磁场，可以使从轴上一点发出的电子重新汇聚在中心轴的另一点上。电磁场对电子显示出透镜的作用，所以称为电子透镜。现代电子显微镜主要利用磁透镜。### 长磁透镜能得到清晰的像，但是不能放大，对电子束有汇聚特性。短磁透镜能放大像，其也能对电子束有汇聚特性。短磁透镜是电镜中实际采用的透镜，但是其放大倍数较小。### 磁浸没透镜：将物体放在接近焦点的地方，即物体浸没在透镜的磁场中，强磁透镜为电子显微镜采用。 透射电子显微镜结构：镜筒，真空系统，电子学系统。与光学显微镜相比，电子枪代替光源，玻璃透镜用磁透镜代替，观察和记录系统相似。### 镜筒：包括电子束照明系统（电子枪，聚光镜），样品室，真空系统，成像系统（物镜，中间镜，投影镜），记录系统。 电子枪发射和加速电子，钨丝为常用灯丝发射电子，电流加热钨丝至2200-2500K时产生热电子发射，电子发生在很大程度上取决于温度。### 阳极：对电子起加速作用，采用负高压，阳极为地电位，阴极负高压。 栅极：又叫控制极，控制电子束的形状和发射强度，稳定灯丝加热电流。 聚光镜：将电子枪发射的电子束汇聚到样品上，调节电子束孔径角，电流密度和照明光斑的大小，一级聚光镜能减小电子束直径20-80倍，二级聚光镜扩大电子束直径1-2倍。### 换样品室：又称样品室，载体为具有200目小孔的铜网，铜网直径3mm，厚50-100um。具有气锁装置，换样品室可以只允许少量的空气进入镜筒，以便在短时间内回复工作真空。### 成像与放大装置：物镜：放大50倍；中间镜放大3倍；中间镜‖放大15倍；投影镜放大200倍，总共能放大500000倍。### 成像系统：物镜，中间镜，投影镜等成像透镜和消像散器组成，采用三级或四级成像系统，也有五级。成像原理：高压电子枪——高速电子束——电磁透镜——样品——电子束发生投射——荧光屏——浓淡不同的图像（浓淡不同的图像反应了样品不同部位的物质结构）### 物镜：对样品的成像和放大。决定电镜的分辨本领。 物镜光