第7章基因的表达与调控(上)概念.ppt

IPTG，异丙基- β –D-硫代半乳糖苷 TMG ，巯甲基半乳糖苷 ONPG, O-硝基半乳糖苷 在研究诱导作用时，很少使用乳糖 安慰诱导物(gratuitous inducer)： 如果某种物质能够促使细菌产生酶而本身又不被分解，这种物质被称为安慰诱导物，如: 10.11 重叠基因的调控作用 重叠基因最早在大肠杆菌噬菌体ΦX174中发现，用不同的阅读方式得到不同的蛋白质，丝状RNA噬菌体、线粒体DNA和细菌染色体上都有重叠基因存在。 TrpB –谷氨酸- 异亮氨酸-终止 GAA -- AUC -- UGA -- UGG -- AA AUG -- GAA 甲硫氨酸 – 谷氨酸–trpA trpE—苏氨酸—苯丙氨酸—终止 ACU -- UUC -- UGA -- UGG -- CU AUG AUG – GCU 甲硫氨酸 -- 丙氨酸-- trpD 翻译终止时核糖体立即处在起始环境中，这种重叠的密码子保证了同一核糖体对两个连续基因进行翻译的机制。 trp操纵子由5个基因(trpE、D、C、B、A)组成，在正常情况下，操纵子中5个基因产物是等量的，但trpE突变后，其邻近的trpD产量比下游的trpBA产量要低得多。这种与ρ蛋白无关的表达调控，已证实是在翻译水平上的调控。 研究trpE和trpD以及trpB和trpA两对基因中核苷酸序列与翻译耦联的关系，发现trpE基因的终止密码子和trpD基因的起始密码子共用一个核苷酸(p279)。 由于trpE的终止密码子与trpD的起始密码重叠，trpE翻译终止时核糖体立即处在起始环境中，这种重叠的密码保证了同一核糖体对两个连续基因进行翻译的机制。 调控（节）蛋白 操纵子 RNA R P O structural genes DNA Protein ＋ 正调控（positive regulation) － 负调控 (negative regulation) 调控蛋白的作用机制 注：R：Regulator P：Promoter O：Operator 正调控系统中的正调控蛋白又被称为无辅基诱导蛋白(apoinducer) 负调控系统中的负调控蛋白又被称为阻遏蛋白（repressor) 可诱导调节：指一些基因在特殊的代谢物或化合物的作用下，由原来关闭的状态转变为工作状态，即在某些物质的诱导下使基因活化。 例：大肠杆菌的乳糖操纵子 分解代谢蛋白的基因 2、根据操纵子对某些能调节它们的小分子的应答，可分为可诱导调节和可阻遏调节两大类： 可阻遏调节：基因平时是开启的，处在产生蛋白质或酶的工作过程中，由于一些特殊代谢物或化合物的积累而将其关闭，阻遏了基因的表达。 例：色氨酸操纵子 合成代谢蛋白的基因 可诱导的负转录调控 可诱导的正转录调控 可阻遏的负转录阻遏 可阻遏的正转录阻遏 操纵子调控系统的基本类型 正调控与负调控并非互相排斥的两种机制，而是生物体适应环境的需要，有的系统既有正调控又有负调控；　　原核生物以负调控为主，真核生物以正调控为主；　　降解代谢途径中既有正调控又有负调控；合成代谢途径中一般以负调控来控制产物自身的合成。 原核基因表达调控特点 ??1、σ因子决定RNA聚合酶识别特异性 ? 原核生物细胞仅含有一种RNA聚合酶，核心酶参与转录延长，全酶司转录起始。在转录起始阶段，σ亚基(又称σ因子)识别特异启动序列；不同的σ因子决定特异编码基因的转录激活，也决定不同RNA(mRNA、rRNA和tRNA)基因的转录。 2、操纵子模型的普遍性? 除个别基因外，原核生物绝大多数基因按功能相关性成簇地串联、密集于染色体上，共同组成一个转录单位──操纵子，如乳糖(lac)操纵子、阿拉伯糖(ara)操纵子及色氨酸(trp)操纵子等。操纵子机制在原核基因调控中具有较普遍的意义。一个操纵子只含一个启动序列及数个可转录的编码基因(通常为2~6个，有的多达20个以上)。在同一启动序列控制下，操纵子可转录出多顺反子mRNA。原核基因的协调表达就是通过调控单个启